專利名稱：一種治療消化系統(tǒng)癌癥ldl－acm復(fù)合藥物的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療消化系統(tǒng)癌癥的針劑，具體地說是一種治療消化系統(tǒng)癌癥低密度脂蛋白—阿克拉霉素復(fù)合物((以下簡稱LDL-ACM)及其制取方法。
2、背景技術(shù)消化系統(tǒng)癌癥發(fā)病率和死亡率均甚高，嚴(yán)重危害人民群眾健康?；熑匀皇悄壳捌渚C合治療措施中的主要手段。在各種腫瘤的治療過程中存在的主要問題是由于抗腫瘤藥物缺乏選擇性，以致于出現(xiàn)許多毒副作用而影響藥物的臨床應(yīng)用，為了提高抗腫瘤藥物的療效并減輕對正常細(xì)胞的毒性作用，醫(yī)學(xué)界多次嘗試把抗體、脂質(zhì)體、激素和其他大分子作為腫瘤化療藥物的載體，以便增加藥物的靶向性，即“靶向治療”。但在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中存在一個主要問題，就是肝臟和脾臟的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)把血液中的這些復(fù)合物作為外來物而迅速從血流中清除，從而減少了藥物—大分子復(fù)合物對腫瘤細(xì)胞的作時間而影響了藥物的治療效果。因此將藥與其他物質(zhì)結(jié)合，使其象導(dǎo)彈一樣精確，只殺死腫瘤細(xì)胞，對正常肌體無毒副作用，將是攻克癌癥的又一里程碑。
3、發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的一種治療消化系統(tǒng)癌癥低密度脂蛋白—阿克拉霉素復(fù)合藥物的制備取方法的技術(shù)方案是按以下方式實(shí)現(xiàn)的，抽取患者自身的空腹血液，從中提取低密度脂蛋白，經(jīng)過提純制得靶向藥物的載體，然后與治療癌癥的靶向藥物進(jìn)行復(fù)合，再注射到患者的身體中達(dá)到治療消化系統(tǒng)癌癥的目的通過臨床實(shí)踐證明，低密度脂蛋白—阿克拉霉素(LDL-ACM)復(fù)合藥物治療消化系統(tǒng)癌癥已獲得滿意療效，且無明顯化療毒副作用。包括胃癌在內(nèi)的多種腫瘤細(xì)胞特別是耐藥性腫瘤細(xì)胞膜上，低密度脂蛋白受體的活性明顯增強(qiáng)，腫瘤細(xì)胞對低密度脂蛋白(以下簡稱LDL)的攝取明顯增加。
利用LDL作為抗腫瘤藥物阿克拉霉素(以下簡稱ACM)的載體實(shí)現(xiàn)治療腫瘤的藥物靶向作用的可行性引起了廣泛的關(guān)注。
LDL較其他人工合成的載體具有更多的優(yōu)點(diǎn)(1)對于具有細(xì)胞毒付作用的高親脂性藥物來說，LDL是一種適合的傳輸載體；另一方面，在其內(nèi)藥物也避免了血漿中酶的水解；(2)LDL是一種生理的載體，不會被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)清除，
從而延長了抗腫瘤藥物的血漿半衰期；(3)腫瘤細(xì)胞通過LDL受體途徑內(nèi)在化和代謝細(xì)胞外的LDL，這種高效的過程可以引起不同的藥理性作用，可是消除一些抗藥性的機(jī)制。
4、實(shí)施方式本發(fā)明的一種治療消化系統(tǒng)癌癥LDL-ACM復(fù)合藥物的制備方法，其具體制備步驟如下第一步LDL的制備(1)制備KBr-NaEDPA溶液稱取KBr1.080g，加入0.0022mol/L的NaEDPA100ml的水溶液中溶解攪拌均勻備用。
(2)抽取患者空腹血液200ml，300r/m離心10分鐘，取上清液，用KBr-NaEDPA溶液調(diào)密度為1.01p，溫度控制在4℃，用離心機(jī)于47000r/m的轉(zhuǎn)速離心18小時，吸除上層的VLDL溶液，留下剩余部分備用；(3)將吸除上層的VLDL后的剩余液體混勻，再用KBr-NaEDPA溶液調(diào)整密度為1.063p，控制溫度4℃，用離心機(jī)于47000r/m的轉(zhuǎn)速，離心20小時，吸取上面的LDL備用；第二步對LDL進(jìn)行透析提純(1)透析液的制備稱取Na2HPO4.12H2O 179g，NaCl 58.44g，EDTA1000mg溶于蒸餾水調(diào)整體積至1000ml，用2mol/L HCl調(diào)PH＝7.4備用；(2)將LDL裝入透析袋，再將透析袋浸在500ml透析液中，加電磁攪拌，控制溫度4℃，攪拌透析24-48小時，透析過程中更換6次透析液500ml；(3)向透析后的溶液中加入20μg/ml凝血酶，溫度升至24℃，攪拌處理10分鐘，用0.22μm微孔濾膜過濾除菌，分瓶包裝，每瓶含LDL 40mg，置4℃溫度下保存?zhèn)溆?，第三步LDL-ACM復(fù)合藥物的制備采用溫育交換法精稱ACM原料藥80mg，加入到含有40mg LDL的溶液中，加蒸餾水調(diào)整總體積為20ml，置40℃水浴恒溫振蕩3小時，然后將溶液裝透析袋中于溫度4℃避光透析48小時，除去游離ACM，再經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾除菌后，制成LDL-ACM復(fù)合藥物，置溫度4℃下保存?zhèn)溆谩?br> 第四步臨床應(yīng)用每天靜脈輸注LDL-ACM復(fù)合藥物一次，20天為一療程，需要3-5個療程，療程之間間隔10天。
臨床典型病例1、王××，男，72歲，胃癌中晚期，行手術(shù)切除，術(shù)中發(fā)現(xiàn)腹腔內(nèi)淋巴結(jié)廣泛轉(zhuǎn)移，術(shù)后15天給予低密度脂蛋白—阿克拉霉素(LDL-ACM)復(fù)合物治療3個療程，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。
2、于××，女，胃癌晚期，給予低密度脂蛋白—阿克拉霉素(LDL-ACM)復(fù)合物治療3個療程，腫瘤組織逐漸縮小，治療5個療程，腫瘤組織逐漸消失，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。
3、劉××，男，66歲，食道癌中晚期，行手術(shù)切除，術(shù)中發(fā)現(xiàn)縱膈及主動脈轉(zhuǎn)移，術(shù)后15天給予低密度脂蛋白—阿克拉霉素(LDL-ACM)復(fù)合物治療3個療程，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。
4、周××，女，75歲，結(jié)腸癌中晚期，行手術(shù)切除，術(shù)中發(fā)現(xiàn)廣泛腹腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，術(shù)后15天給予低密度脂蛋白—阿克拉霉素(LDL-ACM)復(fù)合物治療3個療程，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。
5、李××，男，57歲，胃癌中晚期，行手術(shù)切除，術(shù)中發(fā)現(xiàn)腹膜后轉(zhuǎn)移，術(shù)后15天給予低密度脂蛋白—阿克拉霉素(LDL-ACM)復(fù)合物治療3個療程，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。
6、張××，男，78歲，胃癌晚期，給予低密度脂蛋白—阿克拉霉素(LDL-ACM)復(fù)合物治療3個療程，腫瘤組織逐漸縮小，治療5個療程，腫瘤組織逐漸消失，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。
7、高××，女，64歲，胃癌中晚期，行手術(shù)切除，術(shù)中發(fā)現(xiàn)腹腔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，術(shù)后15天給予低密度脂蛋白—阿克拉霉素(LDL-ACM)復(fù)合物治療3個療程，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。
8、胡××，男，72歲，食道癌中晚期，行手術(shù)切除，術(shù)中發(fā)現(xiàn)胸腔內(nèi)轉(zhuǎn)移，術(shù)后15天給予低密度脂蛋白—阿克拉霉素(LDL-ACM)復(fù)合物治療3個療程，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。
9、馬××，女，74歲，結(jié)腸癌晚期，給予低密度脂蛋白—阿克拉霉素(LDL-ACM)復(fù)合物治療3個療程，腫瘤組織逐漸縮小，治療5個療程，腫瘤組織逐漸消失，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。
10、胡××，男，72歲，食道癌中晚期，行手術(shù)切除，術(shù)中發(fā)現(xiàn)縱膈轉(zhuǎn)移，術(shù)后15天給予低密度脂蛋白—阿克拉霉素(LDL-ACM)復(fù)合物治療3個療程，隨訪3年，未復(fù)發(fā)。
療效統(tǒng)計使用本發(fā)明的LDL-ACM復(fù)合藥物，共治療消化系統(tǒng)癌癥患者215人，有效率達(dá)100％，3年存活率達(dá)96％以上。
權(quán)利要求
1.一種治療消化系統(tǒng)癌癥LDL-ACM復(fù)合藥物的制備方法，其特征在于制備步驟如下第一步LDL的制備(1)KBr-NaEDPA溶液的制備稱取KBr 1.080g，加入0.0022mol/L的NaEDPA100ml的水溶液中溶解攪拌均勻；(2)抽取患者空腹血液200ml，300r/m離心10分鐘，取上清液，用KBr-NaEDPA溶液調(diào)密度為1.01ρ，溫度控制在4℃，用離心機(jī)于47000r/m的轉(zhuǎn)速離心18小時，吸除上層的VLDL，剩余部分備用；(3)將吸除上層的VLDL后的剩余液體混勻，再用KBr-NaEDPA溶液調(diào)整密度為1.063ρ，控制溫度4℃，用離心機(jī)于47000r/m的轉(zhuǎn)速，離心20小時，吸取上面的LDL備用；第二步對LDL進(jìn)行透析提純(1)透析液的制備稱取Na2HPO4.12H2O 179g，NaCl 58.44g，EDTA1000mg溶于蒸餾水中調(diào)整體積至1000ml，再用2mol/L HCl調(diào)PH＝7.4備用；(2)將LDL裝入透析袋，再將透析袋浸在500ml透析液中，控制溫度4℃，電磁攪拌透析24-48小時備用，透析過程中要換6次透析液，每次更換透析液500ml；(3)向透析后的溶液中加入20μg/ml凝血酶，溫度升至24℃，攪拌處理10分鐘，用0.22μm微孔濾膜過濾除菌，分瓶裝，每瓶含LDL 40mg，置4℃溫度下保存?zhèn)溆?；第三步LDL-ACM復(fù)合藥物的制備，采用溫育交換法，精稱ACM原料藥80mg，加入到含有40mg LDL的溶液中，加蒸餾水調(diào)整總體積為20ml，40℃水浴，恒溫振蕩3小時，然后將溶液裝透析袋中置于500ml透析液中，控制溫度4℃，避光透析48小時，除去游離ACM，再經(jīng)0.22μm微孔濾膜過濾除菌后，制成LDL-ACM復(fù)合藥物，置溫度4℃下保存?zhèn)溆谩?br> 全文摘要
本發(fā)明提供一種治療消化系統(tǒng)癌癥LDL－ACM復(fù)合藥物及其制備方法，該方法是抽取患者自身的空腹血液，從中提取低密度脂蛋白，經(jīng)過提純制得靶向藥物的載體，然后與治療癌癥的阿克拉霉素藥物進(jìn)行復(fù)合，再注射到患者的身體中達(dá)到治療消化系統(tǒng)癌癥的目的。通過臨床實(shí)踐證明，低密度脂蛋白－阿克拉霉素(LDL－ACM)復(fù)合藥物治療消化系統(tǒng)癌癥已獲得滿意療效，且無明顯化療毒副作用。本發(fā)明的LDL－ACM復(fù)合藥物在臨床上應(yīng)用，共治療消化系統(tǒng)癌癥患者215人，有效率達(dá)100％，3年存活率達(dá)96％以上，因此具有很好的推廣使用價值。
文檔編號A61K31/704GK1706395SQ20051004356
公開日2005年12月14日 申請日期2005年5月20日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月20日
發(fā)明者王培林, 杜新民 申請人:王培林, 杜新民