專利名稱：：用作平滑肌細(xì)胞增殖抑制劑的苯乙烯基苯并咪唑衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及可用作平滑肌細(xì)胞增殖抑制劑的苯乙烯基苯并咪唑衍生物，并涉及這些化合物和含有這些化合物的藥物組合物在治療與平滑肌細(xì)胞增殖有關(guān)的疾病或病癥中的應(yīng)用，本發(fā)明還涉及這些化合物的制備方法。在這些如高血壓誘發(fā)的血管改型，血管再狹窄，和動(dòng)脈粥樣硬化的病理過程中，血管平滑肌細(xì)胞的增殖和定向遷移是造成血管閉塞的重要因素(Gibbons，G.H.；Dzau，V.J.；NEJM，1994；3301431)。基于致病過程的病因?qū)W，所有這些病理過程均稱之為過度增殖性血管疾病。血管閉塞發(fā)生在內(nèi)膜平滑肌細(xì)胞增殖引起的狹窄之后(Clowes，A.W.；Reidy，M.A.；血管外科學(xué)雜志(J.Vase.Surg.)，1991，13885)。內(nèi)膜平滑肌細(xì)胞增殖的根本原因在于導(dǎo)致內(nèi)皮和細(xì)胞外基質(zhì)破壞的血管平滑肌細(xì)胞損傷(Schwartz，S.M.，人體病理學(xué)(HumanPathology)，1987；18240；Fingerle，J.，動(dòng)脈硬化癥(Arteriosclerosis)，1990；101082)。通常，動(dòng)脈壁細(xì)胞處于封閉負(fù)控制之下并處于低基礎(chǔ)增殖狀態(tài)或處于靜止非增殖狀態(tài)。在血管損傷后，生長(zhǎng)因子和細(xì)胞因子的釋放導(dǎo)致平滑肌細(xì)胞增殖和遷移(Fagin，J.A.；Forrester，J.S.，TrendsinCardiovascularMed.，1992；290.；Shiratani，M.，；Yui，Y.；Kawai，C.，Endothelium，1993；15)。致使內(nèi)膜增生的血管損傷可由免疫反應(yīng)或由浸入性心血管手術(shù)引起。動(dòng)脈粥樣硬化癥是生物物質(zhì)介導(dǎo)的血管損傷的常見形式，并繼發(fā)成狹窄。血管平滑肌細(xì)胞的異常增殖具有在內(nèi)皮損傷部位上產(chǎn)生導(dǎo)致阻塞性新內(nèi)膜損傷的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的病理特征(Ross，R.，自然(Nature)，1993362；801；Cascells，W.，循環(huán)(Circulation)，1992；86723)。引起內(nèi)膜增生的物理?yè)p傷可能發(fā)生在血管成形手術(shù)、器官移植外科手術(shù)和其它破壞血管完整性的血管浸入手術(shù)之后(Clowes，A.W.；Reidy，M.A.，血管外科學(xué)雜志(J.Vasc.Surg.)，1991；13885；Isik，F(xiàn).F.；McDonald，T.O.；Ferguson，M.；Yanaka，E.，美國(guó)病理學(xué)雜志(Am.J.Pathol.)，1992；1411139)。對(duì)于冠狀動(dòng)脈狹窄的治療，經(jīng)皮經(jīng)腔冠狀動(dòng)脈成形術(shù)已被廣泛接受。在這種手術(shù)中，內(nèi)皮被損傷并與各種造血性的或在損傷部位釋放的化學(xué)引誘劑和促細(xì)胞分裂劑接觸。這些物質(zhì)中，血小板衍生的生長(zhǎng)因子(PDGF)被認(rèn)為在平滑肌細(xì)胞增殖和趨化性過程中起著重要作用(Reidy，M.A.；Fingerle，J.；Lindner，V.；循環(huán)(Circulation)，199386(supplIII)III-43；Ferns，G.A.A.；Raines，E.W.；Sprugel，K.H.；Montani，A.S.；Reidy，M.A.；Ross，R.；科學(xué)(Science)，1991；2531129.；Jawien，A.等人，臨床研究雜志(J.Clin.Invest.)，1992；89507；Nabel，E.G.等人，臨床研究雜志(J.Clin.Invest.)，1993；911822)。在血管成形手術(shù)后的3至6個(gè)月內(nèi)，大約有30-40％患者的血流量明顯降低，這是由于應(yīng)答此手術(shù)過程中造成的血管損傷而引起的再狹窄的結(jié)果。這些患者隨后需要進(jìn)行第二次手術(shù)(Pepine，C.，循環(huán)(Circulation)，1990；811753.；Hardoff，R.J.，美國(guó)心臟學(xué)院雜志(J.Am.Coll.Cardiol.)，1990；151486)。因此，限制再狹窄過程的藥物具有顯著優(yōu)點(diǎn)。能抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖、特別是能抑制PDGF刺激增殖的藥物將用于治療血管增殖性疾病(Molloy，C.J.，DrugDev.Res.，1993；29148；Newby，A.C.；George，S.J.，心血管研究(cardiovasc.Res.)，1993；271173)。DE4,129,603公開了用作膠原誘導(dǎo)血小板聚集和纖蛋白原抑制劑的稠合雜環(huán)化合物，它們還可在“經(jīng)腔血管成形術(shù)的治療”中使用。US5,387,600公開了用于治療動(dòng)脈粥樣硬化的2-硫代取代的苯并咪唑。US5,026,705公開了作為增強(qiáng)肌收縮力劑的2-苯乙烯基苯并咪唑基噠嗪酮，它們可用于治療充血性心力衰竭。Pol.J.Pharmacol.Pharm.，1981，33，217(CA96293)中已公開了2-[α-氰基-β-芳基乙烯基]苯并咪唑衍生物具有結(jié)核菌抑制活性。WO9116305公開了用作抗細(xì)胞增殖劑的二雜環(huán)丙烯腈衍生物。US5,196,446公開了用作抗細(xì)胞增殖劑的吲哚基丙烯腈類化合物。下述文獻(xiàn)中已公開了一些苯乙烯基苯并咪唑Zh.Obshch.Khim.32，2624-33(1962)；Zhumalprikladnoispektrokopii，Vol2，No.1，pp.63-68(1965)和無機(jī)化學(xué)學(xué)報(bào)(InorganicaChimicaActa)，191(1992)，131-191。但沒有公開它們的生物或治療活性。日本專利公開(JPKokai)7481369中公開了一些可用作消炎劑的1-芐基取代的苯并咪唑類化合物，并且醫(yī)學(xué)化學(xué)雜志(J.Med.Chem.)，1970，13(4)，784-6中報(bào)道了一些具有治療活性的苯并咪唑化合物。本發(fā)明提供了式I或式II化合物或它們的可藥用鹽其中R代表苯基或被鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烷基、三氟甲基取代的苯基，或者R代表呋喃基、吡啶基或喹啉基；R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫，C1-C6烷基，C6-C12芳基或任選地被C2-C6-烷氧羰基取代的C7-C12芳烷基；R4和R5代表氫或C1-C6烷基；其條件是式I化合物不包括下列化合物1-芐基-5(6)甲基-2-(2，4-二氯苯乙烯基)苯并咪唑；5-氯-2[2-(對(duì)-氯苯基)乙烯基]-1-甲基-苯并咪唑；2-[2-(對(duì)-氯苯基)乙烯基]-5-甲氧基-1-甲基苯并咪唑；2-(對(duì)-氯苯乙烯基)-1，5，6-三甲基-苯并咪唑；2-(3，4-二甲氧基苯乙烯基)-1-甲基-苯并咪唑；2-[2-(4-氯苯基)乙烯基]-1-甲基-1H-苯并咪唑；1-甲基-2-苯乙烯基-苯并咪唑；2-(對(duì)-氟苯乙烯基)-1-甲基-苯并咪唑；2-(對(duì)-氯苯乙烯基)-1-甲基-苯并咪唑；2-(對(duì)-溴苯乙烯基)-1-甲基-苯并咪唑；2-(對(duì)-甲氧基苯乙烯基)-1-甲基-苯并咪唑；2-(對(duì)-甲基苯乙烯基)-1-甲基-苯并咪唑；2-(對(duì)-氟苯乙烯基)-苯并咪唑；2-(對(duì)-氯苯乙烯基)-苯并咪唑；2-(對(duì)-溴苯乙烯基)-苯并咪唑；2-(對(duì)-甲氧基苯乙烯基)-苯并咪唑；2-苯乙烯基-苯并咪唑；2-(2-氯苯乙烯基)-1-甲基-苯并咪唑。本發(fā)明的另一方面提供了上述式I或II化合物的可藥用鹽，其中R代表苯基或被鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烷基、三氟甲基取代的苯基，或者R代表呋喃基、吡啶基或喹啉基；R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫，C1-C6烷基，C6-C12芳基或任選地被C2-C6-烷氧羰基取代的C7-C12芳烷基；以及R4和R5為氫或C1-C6烷基。本發(fā)明的優(yōu)選方案之-提供了上述式I或II化合物或它們的可藥用鹽，其中R代表呋喃基，吡啶基或喹啉基；R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫，C1-C6烷基，C6-C12芳基或任選地被C2-C6-烷氧羰基取代的C7-C12芳烷基；以及R4和R5為氫或C1-C6烷基。本發(fā)明另一優(yōu)選方案提供了具有下面結(jié)構(gòu)的上述式I化合物或其可藥用鹽其中R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基。本發(fā)明的再一優(yōu)選方案提供了上述式II化合物或其可藥用鹽，其中R代表苯基或被鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烷基、三氟甲基取代的苯基、或者R代表呋喃基，吡啶基或喹啉基；R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫，C1-C6烷基，C6-C12芳基或任選地被C2-C6-烷氧羰基取代的C7-C12芳烷基；R4和R5代表氫或C1-C6烷基。R優(yōu)選代表呋喃基，吡啶基，苯基或取代苯基。苯基上的取代基優(yōu)選為C1-C6烷氧基，特別是甲氧基。R1和R2優(yōu)選代表氫，C1-C6烷氧基(特別是甲氧基)，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基(特別是羧酸甲酯基，或C7-C12芳氧基羰基(特別是苯基甲酮(phenylmethanone)基)。R3優(yōu)選代表氫或C2-C6-烷氧羰基取代的芐基(特別是苯甲酸甲酯基)。R4和R5優(yōu)選代表氫或甲基。特別優(yōu)選的化合物包括·E)-2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽?！?-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-5-甲氧基-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽?！2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑-5-基}-苯基甲酮或其可藥用鹽。·2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-4，7-二甲氧基-5，6-二甲基-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽?！?E)-2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯或其可藥用鹽。·(E)-2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑-5-羧酸或其可藥用鹽?！?E)-2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-5-硝基-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽。·4-{2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-4，7-二甲氧基-5，6-二甲基苯并咪唑-1-基甲基}苯甲酸甲酯或其可藥用鹽?！?-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-4，7-二酮或其可藥用鹽。·(E)-5-硝基-2-(2-吡啶-4-基-乙烯基)-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽。·(E)-2-(2-呋喃-3-基-乙烯基)-5-硝基-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽。本發(fā)明化合物可按下述反應(yīng)流程中所示的一般反應(yīng)步驟制備亞氨基醚鹽酸鹽(2)通過合適的腈與醇和過量氯化氫在0℃下反應(yīng)制備。在回流的乙醇中反應(yīng)(2)和1，2-二氨基苯，可以得到相應(yīng)的2-苯乙烯基苯并咪唑(4)。利用氫化鈉作為堿，在二甲基甲酰胺中采用烷基、芳基或芳烷基鹵烷基化(4)，得到式I化合物。式II化合物可通過用硝酸銫銨氧化式I的1，4-二甲氧基衍生物制備。將兩當(dāng)量硝酸銫銨溶于1∶4的水/乙腈中，并滴加到合適的1，4-二甲氧基苯乙烯基苯并咪唑和乙酸的溶液內(nèi)。在40℃加熱混合物1小時(shí)，得到式II化合物。因此，本發(fā)明的另一方面提供了制備本發(fā)明所述的式I或II化合物的方法，該方法包括(a)使本文所定義的式1腈與醇和氯化氫反應(yīng)，產(chǎn)生式2化合物，和(b)在醇存在下，將式2化合物與本文所定義的式3化合物反應(yīng)，產(chǎn)生式4化合物，以及(c)在烷基化劑存在下，使式4化合物與R3-鹵化物反應(yīng)，產(chǎn)生本發(fā)明所述的式I化合物，(d)并任選地將本文所定義的式5化合物與(NH4)2Ce(N)3)6在乙酸存在下反應(yīng)，產(chǎn)生本發(fā)明所述的式II化合物?？伤幱玫乃峒映甥}衍生自這些有機(jī)和無機(jī)酸如乙酸，乳酸，檸檬酸，富馬酸，酒石酸，琥珀酸，馬來酸，丙二酸，鹽酸，氫溴酸，磷酸，硝酸，硫酸，甲磺酸，甲基苯磺酸，以及已知的可接受的類似酸。對(duì)于具有酸性取代基的化合物如羧酸化合物，可藥用鹽還包括堿金屬鹽(鈉或鉀鹽)，堿土金屬鹽(鈣或鎂鹽)以及銨鹽。本發(fā)明包括僅由苯乙烯基苯并咪唑類化合物本身或它們與賦形劑(即無藥理作用的可藥用物質(zhì))一起組成的藥物組合物。這種組合物適用于治療平滑肌細(xì)胞過度增殖表征的疾病，其中所述的增殖最常見的是由血管整復(fù)外科和移植，如氣囊插入血管成形術(shù)，血管移植外科，冠狀動(dòng)脈分流術(shù)，和心臟移植引起的。其它其中存在有不希望的血管增殖的病癥包括高血壓，哮喘，和充血性心力衰竭。因此，本發(fā)明化合物適于治療這些疾病和病癥。本發(fā)明化合物可系統(tǒng)施用，例如可通過靜脈注射方式，典型的劑量為0.1-10mg/kg/h，連續(xù)施用5-30天，或以低于靜脈注射的劑量皮下注射方式或以高于靜脈注射的劑量口服方式施用。如果合適的話，采用適當(dāng)?shù)倪B續(xù)釋放裝置如支持基質(zhì)，采用經(jīng)膜、經(jīng)皮或其它局部施用途徑，還可實(shí)現(xiàn)本發(fā)明化合物的定域傳送。本發(fā)明的組合物可與常規(guī)賦形劑一同配制，所述賦形劑是例如填料、崩解劑、粘結(jié)劑、潤(rùn)滑劑、矯味劑等。它們按常規(guī)方式配制。本發(fā)明化合物可單獨(dú)或與固體或液體藥用載體一同施用于需要這種治療的患者。適用的固體載體可包括一種或多種也可以作為矯味劑、潤(rùn)滑劑、增溶劑、懸浮劑、填料、助流劑、壓片助劑、粘結(jié)劑或片劑崩解劑的物質(zhì)或膠囊包封材料。對(duì)于粉劑，載體為能與細(xì)碎活性成分混合的細(xì)碎固體。而就片劑而言，可將活性成分以適當(dāng)比例與具有需要壓制特性的載體混合，并壓制成具有所需形狀和大小的片劑。粉劑和片劑優(yōu)選含有多至99％的活性成分。合適的固體載體包括，例如，磷酸鈣、硬脂酸鎂、滑石、蔗糖、乳糖、糊精、淀粉、纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、聚乙烯吡咯烷酮、低熔點(diǎn)蠟和離子交換樹脂。液體載體可用于制備溶液、懸浮液、乳劑、糖漿和酏劑。本發(fā)明的活性成分可溶于或懸浮在可藥用液體載體中，這些載體是例如水、有機(jī)溶劑、它們的混合物或可藥用的油或脂肪。液體載體中可包含其它合適的藥用添加劑如增溶劑、乳化劑、緩沖劑、防腐劑、甜味劑、矯味劑、懸浮劑、增稠劑、著色劑、粘度調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑或滲透調(diào)節(jié)劑。適合口服和非腸道給藥用的液體載體的合適例子包括水(特別是含有上述添加劑如纖維素衍生物，優(yōu)選羧甲基纖維素鈉的溶液)，醇(包括一元醇和多元醇如二元醇)及其衍生物，以及油(如精制椰子油和花生油)。對(duì)于非腸道給藥，載體還可以為油酯如油酸乙酯和肉豆蔻酸異丙酯。無菌液體載體可用于非腸道給藥用的無菌液態(tài)組合物中。滅菌溶液或懸浮液形式的液體藥物組合物可通過如肌內(nèi)，腹膜內(nèi)或皮下注射施用。滅菌溶液還可以通過靜脈內(nèi)注射施用?？诜┯玫慕M合物可以是液體或固體組合物形式。優(yōu)選的藥物組合物為單位劑量形式，如片劑或膠囊。在這種形式中，組合物可被細(xì)分成含有適當(dāng)量活性成分的均分單位劑量；單位劑量形式可以是包裝組合物，例如包裝粉劑、小瓶、安瓿、預(yù)填裝注射器或含有液體的小囊(sachets)。單位劑量形式可以是，例如，膠囊或片劑本身，或可以是適當(dāng)數(shù)量任何這類組合物的包裝形式。因此，本發(fā)明的另一方面提供了藥物組合物，其中包括本發(fā)明所述的式I或II化合物或它們的可藥用鹽，以及可藥用載體。治療患有平滑肌細(xì)胞增殖相關(guān)疾病的特定患者所用的劑量必須由主治醫(yī)生本人決定。其它可變的影響因素包括特定病癥和疾病的嚴(yán)重程度、患者的年齡和反應(yīng)情況。本發(fā)明化合物適用于預(yù)防哺乳動(dòng)物的平滑肌細(xì)胞增殖。因此，本發(fā)明提供了治療哺乳動(dòng)物、特別是預(yù)防哺乳動(dòng)物平滑肌細(xì)胞增殖的方法，包括給這種哺乳動(dòng)物口服或非腸道施用本發(fā)明所述的式I或II化合物。本發(fā)明也提供了本發(fā)明所述的I或II化合物在治療哺乳動(dòng)物、特別是在預(yù)防哺乳動(dòng)物的平滑肌細(xì)胞增殖中的應(yīng)用，包括給這種哺乳動(dòng)物口服或非腸道施用本發(fā)明所述的式I或II化合物。本發(fā)明還提供了本發(fā)明所述的式I或II化合物在制備治療哺乳動(dòng)物、特別是預(yù)防哺乳動(dòng)物平滑肌細(xì)胞增殖的藥物中的應(yīng)用，包括給這種哺乳動(dòng)物口服或非腸道施用本發(fā)明所述的式I或II化合物。如下所述，采用離體豬主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞，按照改進(jìn)的Castellot等人(J.Biol.Chem257(19)11256(1982))的方法，測(cè)定本發(fā)明化合物抑制平滑肌細(xì)胞增殖的能力將已仔細(xì)去除了脂肪組織的新鮮豬主動(dòng)脈用含2％抗生素-抗菌素(100x)液體(每毫升含10,000單位青霉素(堿)，10,000μg鏈霉素(堿)，和25ug兩性霉素B；此溶液通過使用青霉素G(鈉鹽)、硫酸鏈霉素和商標(biāo)為Fungizone的兩性霉素B溶于0.85％鹽水配成，購(gòu)自GibcoLaboratories，GrandIslandBiologicalCo.，GrandIsland，NY)的無菌磷酸鹽緩沖的鹽水溶液沖洗。然后將組織在含有I型膠原酶，165U/mL；III型彈性蛋白酶，15U/mL；BSA，2mg/mL；和大豆胰蛋白酶，0.375mg/mL的10-15mL酶溶液中消化，接著在5％CO2氣氛中于37℃溫育10至15分鐘。經(jīng)過此處理之后，通過用鑷子去皮除去外表面外膜。爾后沿縱向切割動(dòng)脈并鋪開，刮去內(nèi)皮層。將細(xì)胞的中層在酶溶液中沖洗并置于含有10mL酶溶液的新制100mm培養(yǎng)皿內(nèi)。用小剪刀將細(xì)胞中層切碎并在30mL新鮮酶溶液中于37℃下酶切消化2-3小時(shí)。消化之后，利用帶火焰拋光吸頭的無菌巴氏吸管或帶200-1000μL無菌吸管吸頭的Eppendorf吸管均化中層組織。隨后以8000rpm離心懸浮液10分鐘，將沉淀懸浮在4-6mL新鮮酶溶液內(nèi)并移入到4-6個(gè)帶有通氣瓶塞的100mm瓶?jī)?nèi)。然后使細(xì)胞生長(zhǎng)至融合用0.25％胰蛋白酶分裂。采用SMC肌動(dòng)蛋白的抗體測(cè)定細(xì)胞的純度和總數(shù)量。在次融合條件下，在早期傳代(一般3-7次傳代)階段測(cè)定細(xì)胞數(shù)。使培養(yǎng)物在16mm(24孔)多孔培養(yǎng)板中于補(bǔ)加有10％胎牛血清和2％抗生素/抗菌素的199培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。在次融合條件下，將細(xì)胞在已知成分的無血清淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基(AIM-V；Gibco)中靜置培養(yǎng)24-48小時(shí)，隨后開始試驗(yàn)。通過向除去血清的同步細(xì)胞中加入試驗(yàn)化合物、3H-胸苷和血清或特異性生長(zhǎng)因子，啟動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)步驟。對(duì)于每種細(xì)胞類型，使生長(zhǎng)因子和血清刺激物最佳化。將試驗(yàn)化合物以50倍稀釋加到每一孔中(20μL/孔)并將培養(yǎng)板在5％CO2氣氛下于37℃溫育24-36小時(shí)。將試驗(yàn)化合物溶于50％乙醇中并以1、10和100μM濃度進(jìn)行測(cè)定。作為對(duì)照，在其中RG50872為5μM濃度的每一細(xì)胞標(biāo)本條件下，常規(guī)測(cè)定RG50872(Bilder，G.A.等人，Am.J.CellPhysiol.，1991；260C721)。當(dāng)實(shí)驗(yàn)完成時(shí)，將培養(yǎng)板置于冰上，用冰冷的PBS洗滌三次，并在冰冷的10％三氯乙酸(TCA)中孵育30分鐘以除去酸溶蛋白。將每孔中的溶液移入到含有0.4NHCl(500μL/瓶，用于中和NaOH)的閃爍瓶?jī)?nèi)，并用水(500μL)沖洗每孔兩次，達(dá)到2mL/閃爍瓶總體積。將閃爍瓶在閃爍計(jì)數(shù)器上計(jì)數(shù)測(cè)定，無論是對(duì)照組還是試驗(yàn)樣品，均一式三份。對(duì)照組(100％)值由最大刺激細(xì)胞得到(由生長(zhǎng)因子或血清刺激物產(chǎn)生的結(jié)果)。試驗(yàn)值由經(jīng)生長(zhǎng)因子或血清最大刺激并被試驗(yàn)化合物處理過的細(xì)胞得到(測(cè)定中所用的血小板衍生生長(zhǎng)因子為人重組PDGF-AB，購(gòu)自UpstateBiotechnologyInc.，LakePlacid，NY)。數(shù)值以對(duì)照的百分?jǐn)?shù)表示，并由這些數(shù)值測(cè)定IC50。為辨別細(xì)胞毒性和化合物預(yù)防增殖的能力，采用商業(yè)化改進(jìn)的MTT測(cè)定法測(cè)試受試化合物。簡(jiǎn)短地說，是將細(xì)胞在24孔培養(yǎng)板中培養(yǎng)至70-80％融合。在開始試驗(yàn)之前，將細(xì)胞除血清24-48小時(shí)。為確保MTT測(cè)定法監(jiān)測(cè)的是細(xì)胞毒性而不是增殖作用，在潮濕的CO2培養(yǎng)箱中，于37℃下，將細(xì)胞用50mM受試化合物在不含血清的新鮮培養(yǎng)基中溫育24小時(shí)。當(dāng)化合物處理完成后，加入MTT指示染料在37℃溫育4小時(shí)。然后加溶細(xì)胞，并將每孔中的等份液樣轉(zhuǎn)移到96孔培養(yǎng)板中供分析用。采用ELISA平板讀數(shù)器記錄570nm波長(zhǎng)處的吸光度(參考波長(zhǎng)630nm)。結(jié)果用存活百分率報(bào)道，采用無藥物(100％存活率)和預(yù)加溶(0％存活率)標(biāo)準(zhǔn)。如表I中的數(shù)據(jù)所示，本發(fā)明化合物為有效的平滑肌細(xì)胞增殖抑制劑。表1</tables>對(duì)于本發(fā)明代表性化合物以及它們的制備方法，下面提供了非限制性的說明實(shí)施例。實(shí)施例1步驟13，4-二甲氧基-肉桂亞氨酸甲酯鹽酸鹽在冰浴中冷卻3，4-二甲氧基肉桂腈(10g，；52mmol)的乙醇(150mL)懸浮液。然后將此冰冷混合物用氯化氫飽和。再冷凍反應(yīng)溶液18小時(shí)。過濾收集所形成的沉淀。得到8.0g(60％收率)無色固體3，4-二甲氧基-肉桂亞氨酸甲酯鹽酸鹽。所得產(chǎn)物用于下步反應(yīng)。1HNMR(DMSO-d6；200MHz)δ11.8(br.s，1H)，10.9(br.s，1H)，7.82-7.9(d，1H)，7.3(d，2H)，7.02-7.12(d，1H)，6.81-6.9(d，1H)，4.2(s，3H)和3.76(s，3H)，3.82ppm(s，3H).步驟2(E)-2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑?qū)?，2-苯二胺(0.63g；5.8mmol)和3，4-二甲氧基-肉桂亞氨酸甲酯鹽酸鹽(1.5g；5.8mmol)在甲醇(35mL)中的混合物室溫?cái)嚢?8小時(shí)。將甲醇溶液濃縮至干。殘留物用甲醇-乙醚重結(jié)晶，得到1.3g(67％收率)標(biāo)題化合物，為一鹽酸鹽水合物，系黃色固體，m.p.248℃(分解)。元素分析C17H16N2O2·HCl·H2O計(jì)算值C，60.98；H，5.12；N，8.37.實(shí)測(cè)值C，60.78；H，5.12；N，8.45.質(zhì)譜(EI；M+)m/z280.1HNMR(DMSO-d6；400MHz)δ15.2(br.s，1H)，8.18-8.2(d，1H)，7.76-7.8(m.2H)，7.45-7.54(m，2H)，7.32(d，1H)，7.2-7.3(m，3H)，7.08-7.12(d，1H)，3.83(s，3H)，3.86ppm(s，3H).實(shí)施例22-[2-(3，4二甲氧基苯基)-乙烯基]-5-甲氧基-1H-苯并咪唑?qū)?-甲氧基-1，2-苯二胺二鹽酸鹽(1.55g；7.3mmol)和3，4-二甲氧基-肉桂亞胺酸甲酯鹽酸鹽(1.9g；7.3mmol)在甲醇(50mL)中的混合物室溫?cái)嚢?2小時(shí)。濃縮甲醇溶液至25mL。過濾分離黃色固體。將固體懸浮在甲醇(10mL)中，用氯化氫處理。收集所產(chǎn)生的沉淀，得到515mg(21％收率)標(biāo)題化合物，為一鹽酸鹽水合物，系黃色固體，m.p.246-249℃。元素分析C18H18N2O3·HCl·H2O計(jì)算值C，61.72；H，5.20；N，7.79.實(shí)測(cè)值C，61.61；H，5.37；N，7.84.質(zhì)譜(EI；M+)m/z310.1HNMR(DMSO-d6；400MHz)δ14.8(br.s，1H)，8.3-8.5(d，1H)，7.62-7.63(d.1H)，7.3(d，1H)，7.21-7.23(dd，1H)，7.2(d，2H)，7.07-7.16(m，3H)，3.86-3.88(d，6H)，3.82-3，84ppm(s，3H)。實(shí)施例3{2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑-5-基}-苯基甲酮將3，4-二氨基二苯酮(1.7g；8.0mmol)和3，4-二甲氧基-肉桂亞胺酸甲酯鹽酸鹽(2.0g，；8.0mmol)在甲醇(50mL)的混合物室溫?cái)嚢?8小時(shí)。濃縮甲醇溶液至25mL。過濾分離所產(chǎn)生的黃色固體。用甲醇重結(jié)晶，得到1.14g(37％收率)標(biāo)題化合物，為黃色固體，m.p.211-214℃。元素分析C24H20N2O3計(jì)算值C，74.98；H，5.24；N，7.29.實(shí)測(cè)值C，74.88；H，5.12；N，7.23.質(zhì)譜(FAB；M+H)m/z385.1HNMR(DMSO-d6；400MHz)δ12.9-13.0(br.s，1H)，7.9(s，1H)，7.73-7.77(d，2H)，7.64-7.69(m，4H)，7.55-7.6(t，2H)，7.3(s，1H)，7.16-7.22(d，2H)，7.0(d，1H)，3.83(s，3H)，3.8ppm(s，3H).實(shí)施例4步驟12，3-二甲基-5，6-二硝基-1，4-二甲氧基苯將2，3-二甲基-1，4-二甲氧基苯(16.6g，0.1mol)的乙酸(100mL)溶液在冰浴中冷卻，然后在15分鐘內(nèi)滴加入40mL濃硝酸。加完之后，環(huán)境溫度下攪拌反應(yīng)混合物3小時(shí)，隨后在50℃下加熱20分鐘。真空濃縮溶液至75mL，然后傾到冰水(350mL)內(nèi)。收集黃色沉淀(8.1g)。用乙醇重結(jié)晶，得到5.4g(18.5％收率)2，3-二甲基-5，6-二硝基-1，4-二甲氧基苯，為黃色固體，m.p.147-150℃。步驟22，3-二甲基-5，6-二氨基-1，4-二甲氧基苯加熱2，3-二甲基-5，6-二硝基-1，4-二甲氧基苯(4.0g，15mmol)和乙醇(120mL)形成溶液，隨后加入10％鈀-炭(1.0g)。在45psig下氫化反應(yīng)混合物3小時(shí)。經(jīng)后處理后，得到2.41g(83％收率)2，3-二甲基-5，6-二氨基-1，4-二甲氧基苯，為黃色固體，m.p.107-110℃。步驟32-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-4，7-二甲氧基-5，6-二甲基-1H-苯并咪唑?qū)?，3-二甲基-5，6-二氨基-1，4-二甲氧基苯(2.57g；10mmol)和3，4-二甲氧基-肉桂亞胺酸甲酯鹽酸鹽(1.96g，；10mmol)在甲醇(35mL)的混合物環(huán)境溫度下攪拌18小時(shí)。濃縮甲醇溶液至15mL。過濾分離黃色沉淀。用甲醇重結(jié)晶，得到2.1g(58％收率)標(biāo)題化合物，為黃色固體，m.p.116-119℃。元素分析C21H24N2O4計(jì)算值C，66.46；H，6.57；N，7.60.實(shí)測(cè)值C，66.83；H，6.64；N，7.41.質(zhì)譜(EI；M+)m/z368.1HNMR(DMSO-d6；400MHz)δ12.4-12.5(br.s，1H)，7.6-7.4(d，1H)，7.2(d，1H)，7.07-7.16(m，2H)，7.0(d，1H)，3.84(s，3H)，3.78(s，3H)，2.2ppm(s，3H).實(shí)施例5(E)-2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯將1，2-二氨基-4-甲基羧基苯(3.6g；20mmol)和3，4-二甲氧基-肉桂亞胺酸甲酯鹽酸鹽(5.4g；20mmol)在甲醇(150mL)中的混合物室溫?cái)嚢?8小時(shí)。濃縮溶液至干。殘留物用甲醇重結(jié)晶，得到3.8g(56％收率)標(biāo)題化合物，為黃色固體，m.p.185-188℃。元素分析C19H18N2O4計(jì)算值C，67.45；H，5.36；N，8.28.實(shí)測(cè)值C，67.25；H，5.45；N，8.28.質(zhì)譜(EI；M+)m/z338.1HNMR(DMSO-d6；400MHz)δ12.9(br.s，1H)，8.1(s，1H)，7.63-7.69(d，1H)，7.57-7.62(d，1H)，7.33(d，1H)，7.17-7.21(dd，1H)，7.14-7.19(d，1H)，7.08-7.12(d，1H)，3.86(s，3H)，3.84(s，3H)，3.79ppm(s，3H).實(shí)施例6(E)-2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑-5-羧酸將2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(3.5g；11mmol)在甲醇(75mL)和2.5NNaOH溶液(7.5mL)中的混合物回流3小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物至環(huán)境溫度并攪拌18小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物至干。殘留物溶于水，用2NHCl酸化。收集沉淀。用甲醇重結(jié)晶，得到600mg(15％)標(biāo)題化合物，為奶油色固體，一鹽酸鹽，m.p.大于285℃。元素分析C18H16N2O4HCl計(jì)算值C，59.92；H，4.75；N，7.76.實(shí)測(cè)值C，59.62；H，4.80；N，7.66.質(zhì)譜(EI；M+)m/z324.1HNMR(DMSO-d6；400MHz)δ13.5(br.s，1H)，8.24(d，1H)，8.14-8.2(d，1H)，8.02-8.06(dd，1H)，7.8(d，1H)，7.34(d，1H)，7.26-7.28(dd，1H)，7.2-7.24(d，1H)，7.1(d，1H)，3，87(s，3H)，3.83ppm(s，3H).實(shí)施例7(E)-2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-5-硝基-1H-苯并咪唑?qū)?-硝基-1，2-苯二胺(1.2g；8mmol)和3，4-二甲氧基-肉桂亞胺酸甲酯鹽酸鹽(2.0g；8mmol)在甲醇(70mL)中的混合物回流18小時(shí)。濃縮溶液至干。殘留物用甲醇重結(jié)晶，得到603mg(23％收率)標(biāo)題化合物，為黃色固體，m.p.223-225℃。元素分析C17H15N3O4計(jì)算值C，62.76；H，4.65；N，12.92.實(shí)測(cè)值C，62.67；H，4.62；N，13.05.質(zhì)譜(EI；M+)m/z325.1HNMR(DMSO-d6；400MHz)δ13.2(br.s，1H)，8.4(br.s，1H)，8.1(dd，1H)，7.74(s，1H)，7.62-7.72(m，1H)，7.35(d，1H)，7.19-7.23(dd，1H)，7.17(s，1H)，7.0(d，1H)，3.85(s，3H)，3.8ppm(s，3H).實(shí)施例84-{2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-4，7-二甲氧基-5，6-二甲基苯并咪唑-1-基甲基}-苯甲酸甲酯5分鐘內(nèi)，向氫化鈉(60％油分散物)(150mg；3.5mmol)在20mLDMF的懸浮液內(nèi)滴加入{2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-4，7-二甲氧基-5，6-二甲基-1H-苯并咪唑(1.2g；3.25mmol)的DMF(20mL)溶液。加完之后，環(huán)境溫度攪拌反應(yīng)混合物30分鐘，然后加入4-(溴甲基)苯甲酸甲酯(745mg；3.25mmol)的DMF(10mL)溶液。環(huán)境溫度攪拌反應(yīng)混合物4小時(shí)。濃縮DMF溶液，得到殘留物，加入水。過濾收集固體。用甲醇重結(jié)晶，得到620mg(37％收率)標(biāo)題化合物，淡黃色固體，系半水合物，m.p.111-114℃。元素分析C30H32N2O6·0.5H2O計(jì)算值C，68.56；H，6.33；N，5.33.實(shí)測(cè)值C，68.51；H，6.27；N，5.28.質(zhì)譜(EI；M+)m/z516.1HNMR(DMSO-d6；400MHz)δ7.9(d，2H)，7.72-7.78(d，1H)，7.31(d，1H)，7.2-7.26(m，4H)，6.95(d，1H)，5.9(s，2H)，4.12(s，3H)，3.81(s，3H)，3.79(s，3H)，3.77(s，3H)，3.53(s，3H)，2.1ppm(d，6H).實(shí)施例92-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-4，7-二酮向2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-4，7-二甲氧基-5，6-二甲基-1H-苯并咪唑(2.0g；5.4mmol)的乙酸(15mL)溶液內(nèi)滴加入硝酸銫銨(7.25g；13mmol)的15mL(H2O/CH3CN；3/12)溶液。將反應(yīng)混合物在40℃加熱1小時(shí)。冷卻之后，濾除固體，并濃縮濾液至干，與水混合并再過濾。紅色固體在60℃下真空干燥，隨后懸浮在甲醇中，用氯化氫處理，得到243mg(13.5％收率)標(biāo)題化合物，深棕色固體，系1/4水合物，m.p.248℃(分解)。元素分析C19H18N2O4·0.25H2O計(jì)算值C，66.68；H，5.33；N，8.22.實(shí)測(cè)值C，66.84；H，5.32；N，8.09.質(zhì)譜(EI；M+)m/z338.1HNMR(DMSO-d6；400MHz)δ7.6-7.67(d，1H)，7.22(d，1H)，7.1-7.14(dd，1H)，6.9-7.0(d，1H)，6.94-6.98(d，1H)，3.82(s，3H)，3.78(s，3H)，1.9ppm(s，6H).實(shí)施例10(E)-5-硝基-2-(2-吡啶-4-基-乙烯基)-1H-苯并咪唑?qū)⒈┧?-吡啶酯(1.6g，10mmol)，4-硝基-1，2-苯二胺(1.5g；10mmol)和多磷酸(15g)的混合物在110℃加熱2.5小時(shí)。冷卻反應(yīng)混合物至50℃，隨后傾入冰水(100mL)內(nèi)。濾除不溶物并用氫氧化銨堿化濾液至pH8。所得固體(2.3g)進(jìn)行硅膠快速層析(CH2Cl2/MeOH；9∶1)，得到735mg(28％收率)標(biāo)題化合物，為黃色固體，m.p.高于280℃。元素分析C14H10N4O2計(jì)算值C，63.15；H，3.79；N，21.04.實(shí)測(cè)值C，62.92；H，3.78；N，21.08.質(zhì)譜(EI；M+)m/z266.1HNMR(DMSO-d6；400MHz)δ13.44(br.s，1H)，8.63(dd，2H)，8.35-8.55(br.d，1H)，8.03-8.18(br.s，1H)，7.69-7.83(br.d，2H)，7.65-7.7(dd，2H)，7.52-7.59ppm(s，1H).實(shí)施例11步驟12-呋喃丙烯酰亞胺酸酯鹽酸鹽在冰浴中冷卻2-呋喃丙烯腈(10.9g；91mmol)的乙醇(75mL)溶液。然后將此冰冷溶液用氯化氫飽和。將反應(yīng)混合物再冰凍18小時(shí)。濃縮反應(yīng)混合物至20mL，加入乙醚。得到10.5g(63％收率)棕色固體標(biāo)題化合物，該產(chǎn)物用于下步反應(yīng)。步驟2(E)-2-(2-呋喃-3-基-乙烯基)-5-硝基-1H-苯并咪唑?qū)?-硝基-1，2-苯二胺(1.53g；10mmol)和2-呋喃丙烯酰亞胺酸酯鹽酸鹽(2.21g；11mmol)在乙醇(50mL)中的混合物回流4小時(shí)。濃縮溶液至干。殘留物溶于甲醇中并用木炭處理，得到660mg(25％收率)標(biāo)題化合物，為黃色固體，m.p.230-233℃。元素分析C13H9N3O3計(jì)算值C，61.18；H，3.55；N，16.46.實(shí)測(cè)值C，60.97；H，3.29；N，16.15.質(zhì)譜(EI；M+)m/z255.1HNMR(DMSO-d6；400MHz)δ13.2(br.s，1H)，8.4(br.s，1H)，8.1(dd，1H)，7.9(d，1H)，7.62-7.8(m，2H)，6.92-7.0(d，1H)，6.88(d，1H)，6.6ppm(d，1H).權(quán)利要求書按照條約第19條的修改[國(guó)際局1996年11月27日收到，用修改的權(quán)利要求1-23替換原始權(quán)利要求1-27]1.式I或II化合物其中R代表呋喃基，吡啶基，苯基或被C1-C6烷氧基取代的苯基；R1和R2代表氫，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫或被C2-C6-烷氧羰基取代的芐基；以及R4和R5代表氫或甲基；其條件是式I化合物中，當(dāng)R1，R2和R3代表氫時(shí)，R不代表苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、2，3-二甲氧基苯基、3，4，5-三甲氧基苯基或4-乙氧基苯基、吡啶基、呋喃-2-基或呋喃-3-基，并且式I化合物不包括2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑。2.具有下式結(jié)構(gòu)的式I化合物或其可藥用鹽其中R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；其條件是當(dāng)R1和R2之一代表氫時(shí)，另一個(gè)不代表硝基。3.化合物(E)-2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽。4.化合物2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-5-甲氧基-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽。5.化合物{2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑-5-基}-苯基甲酮或其可藥用鹽。6.化合物2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-4，7-二甲氧基-5，6-二甲基-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽。7.化合物(E)-2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯或其可藥用鹽。8.化合物(E)-2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑-5-羧酸或其可藥用鹽。9.化合物(E)-2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-5-硝基-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽。10.化合物4-{2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-4，7-二甲氧基-5，6-二甲基苯并咪唑-1-基甲基}苯甲酸甲酯或其可藥用鹽。11.化合物2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-4，7-二酮或其可藥用鹽。12.化合物(E)-5-硝基-2-(2-吡啶-4-基-乙烯基)-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽。13.化合物(E)-2-(2-呋喃-3-基-乙烯基)-5-硝基-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽。14.用于治療哺乳動(dòng)物的式I或II化合物或它們的可藥用鹽其中R代表苯基或被鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烷基、三氟甲基取代的苯基，或者R代表呋喃基、吡啶基或喹啉基；R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫，C1-C6烷基，C6-C12芳基或任選地被C2-C6-烷氧羰基取代的C7-C12芳烷基；R4和R5代表氫或C1-C6烷基；其條件是當(dāng)R代表取代苯基以及R1或R2之一代表氫、氯或硝基且另一個(gè)代表氫時(shí)，則R3不代表氫、甲基或芐基，以及當(dāng)R3代表芐基時(shí)，R不代表2，4-二氯苯乙烯基苯并咪唑，當(dāng)R是苯基，R1，R2和R3不全是氫，和當(dāng)R1或R2代表H、硝基或氯且R3代表氫時(shí)，則R不代表氯取代的苯基，以及當(dāng)R1或R2之一代表溴且R3代表氫時(shí)，則R不代表苯基。15.權(quán)利要求14的化合物，所述化合物用于治療與平滑肌細(xì)胞增殖有關(guān)的疾病或病癥。16.根據(jù)權(quán)利要求15的化合物，其中所述平滑肌細(xì)胞增殖在血管成形術(shù)之后表現(xiàn)為再狹窄。17.下述式I或II化合物或它們的可藥用鹽在制備預(yù)防哺乳動(dòng)物平滑肌細(xì)胞增殖的藥物中的應(yīng)用其中R代表苯基或被鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烷基、三氟甲基取代的苯基，或者R代表呋喃基、吡啶基或喹啉基；R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫，C1-C6烷基，C6-C12芳基或任選地被C2-C6-烷氧羰基取代的C7-C12芳烷基；R4和R5代表氫或C1-C6烷基。18.根據(jù)權(quán)利要求17的用途，其中所述平滑肌細(xì)胞增殖在血管成形術(shù)之后表現(xiàn)為再狹窄。19.一種藥物組合物，包括權(quán)利要求1至16中任一項(xiàng)所述的式I或II化合物和可藥用載體。20.治療哺乳動(dòng)物的方法，包括給這種哺乳動(dòng)物口服或非腸道施用下述式I或II化合物或它們的可藥用鹽其中R代表苯基或被鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烷基、三氟甲基取代的苯基，或者R代表呋喃基，吡啶基或喹啉基；R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫，C1-C6烷基，C6-C12芳基或任選地被C2-C6-烷氧羰基取代的C7-C12芳烷基；R4和R5代表氫或C1-C6烷基。21.根據(jù)權(quán)利要求20的方法，所述方法用于預(yù)防哺乳動(dòng)物的平滑肌細(xì)胞增殖。22.根據(jù)權(quán)利要求21的方法，其中所述的平滑肌細(xì)胞增殖在血管成形術(shù)之后表現(xiàn)為再狹窄。23.下述式I或II化合物或它們的可藥用鹽的制備方法其中R代表苯基或被鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烷基、三氟甲基取代的苯基，或者R代表呋喃基、吡啶基或喹啉基；R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫，C1-C6烷基，C6-C12芳基或任選地被C2-C6-烷氧羰基取代的C7-C12芳烷基；R4和R5代表氫或C1-C6烷基，該方法包括(a)使式1腈與醇和氯化氫反應(yīng)，產(chǎn)生式2化合物(b)在醇存在下，使式2化合物與式3化合物反應(yīng)產(chǎn)生式4化合物(c)在烷基化劑存在下，使式4化合物與R3-鹵化物反應(yīng)，產(chǎn)生式I化合物(d)任選地將式5化合物與(NH4)2Ce(N)3)6在乙酸存在下反應(yīng)，產(chǎn)生式II化合物權(quán)利要求1.式I或II化合物或它們的可藥用鹽其中R代表苯基或被鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烷基、三氟甲基取代的苯基，或者R代表呋喃基、吡啶基或喹啉基；R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫，C1-C6烷基，C6-C12芳基或任選地被C2-C6-烷氧羰基取代的C7-C12芳烷基；R4和R5代表氫或C1-C6烷基；其條件是式I化合物不包括下列化合物1-芐基-5(6)甲基-2-(2，4-二氯苯乙烯基)苯并咪唑；5-氯-2-[2-(對(duì)-氯苯基)乙烯基]-1-甲基-苯并咪唑；2-[2-(對(duì)-氯苯基)乙烯基]-5-甲氧基-1-甲基苯并咪唑；2-(對(duì)-氯苯乙烯基)-1，5，6-三甲基-苯并咪唑；2-(3，4-二甲氧基苯乙烯基)-1-甲基-苯并咪唑；2-[2-(4-氯苯基)乙烯基]-1-甲基-1H-苯并咪唑；1-甲基-2-苯乙烯基-苯并咪唑；2-(對(duì)-氟苯乙烯基)-1-甲基-苯并咪唑；2-(對(duì)-氯苯乙烯基)-1-甲基-苯并咪唑；2-(對(duì)-溴苯乙烯基)-1-甲基-苯并咪唑；2-(對(duì)-甲氧基苯乙烯基)-1-甲基-苯并咪唑；2-(對(duì)-甲基苯乙烯基)-1-甲基-苯并咪唑；2-(對(duì)-氟苯乙烯基)-苯并咪唑；2-(對(duì)-氯苯乙烯基)-苯并咪唑；2-(對(duì)-溴苯乙烯基)-苯并咪唑；2-(對(duì)-甲氧基苯乙烯基)-苯并咪唑；2-苯乙烯基-苯并咪唑；2-(2-氯苯乙烯基)-1-甲基-苯并咪唑。2.式I或II化合物的可藥用鹽其中R代表苯基或被鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烷基、三氟甲基取代的苯基，或者R代表呋喃基、吡啶基或喹啉基；R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫，C1-C6烷基，C6-C12芳基或任選地被C2-C6-烷氧羰基取代的C7-C12芳烷基；R4和R5代表氫或C1-C6烷基。3.式I或II化合物或它們的可藥用鹽其中R代表呋喃基，吡啶基或喹啉基；R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫，C1-C6烷基，C6-C12芳基或任選地被C2-C6-烷氧羰基取代的C7-C12芳烷基；R4和R5代表氫或C1-C6烷基。4.具有下式結(jié)構(gòu)的式I化合物或其可藥用鹽其中R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基。5.式II化合物或其可藥用鹽其中R代表苯基或被鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烷基、三氟甲基取代的苯基，或者R代表呋喃基、吡啶基或喹啉基；R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫，C1-C6烷基，C6-C12芳基或任選地被C2-C6-烷氧羰基取代的C7-C12芳烷基；R4和R5代表氫或C1-C6烷基。6.根據(jù)前述任一項(xiàng)權(quán)利要求的化合物，其中R代表呋喃基，吡啶基，苯基或被C1-C6-烷氧基取代的苯基；R1和R2代表氫，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12芳氧基羰基；R3代表氫或被C2-C6-烷氧羰基取代的芐基；R4和R5優(yōu)選代表氫或甲基。7.化合物(E)-2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽。8.化合物2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-5-甲氧基-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽。9.化合物{2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑-5-基}-苯基甲酮或其可藥用鹽。10.化合物2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-4，7-二甲氧基-5，6-二甲基-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽。11.化合物(E)-2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯或其可藥用鹽。12.化合物(E)-2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-1H-苯并咪唑-5-羧酸或其可藥用鹽。13.化合物(E)-2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-5-硝基-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽。14.化合物4-{2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-4，7-二甲氧基-5，6-二甲基苯并咪唑-1-基甲基}苯甲酸甲酯或其可藥用鹽。15.化合物2-[2-(3，4-二甲氧基苯基)-乙烯基]-5，6-二甲基-1H-苯并咪唑-4，7-二酮或其可藥用鹽。16.化合物(E)-5-硝基-2-(2-吡啶-4-基-乙烯基)-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽。17.化合物(E)-2-(2-呋喃-3-基-乙烯基)-5-硝基-1H-苯并咪唑或其可藥用鹽。18.用于治療哺乳動(dòng)物的式I或II化合物或它們的可藥用鹽其中R代表苯基或被鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烷基、三氟甲基取代的苯基，或者R代表呋喃基、吡啶基或喹啉基；R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫，C1-C6烷基，C6-C12芳基或任選地被C2-C6-烷氧羰基取代的C7-C12芳烷基；R4和R5代表氫或C1-C6烷基；其條件是當(dāng)R代表取代苯基以及R1或R2之一代表氫、氯或硝基且另一代表氫時(shí)，則R3不代表氫、甲基或芐基，且進(jìn)一步當(dāng)R3代表芐基時(shí)，R不代表2，4-二氯苯乙烯基苯并咪唑。19.權(quán)利要求18的化合物，所述化合物用于治療與平滑肌細(xì)胞增殖有關(guān)的疾病或病癥。20.根據(jù)權(quán)利要求19的化合物，其中所述平滑肌細(xì)胞增殖在血管成形術(shù)之后表現(xiàn)為再狹窄。21.下述式I或II化合物或它們的可藥用鹽在制備預(yù)防哺乳動(dòng)物平滑肌細(xì)胞增殖的藥物中的應(yīng)用其中R代表苯基或被鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烷基、三氟甲基取代的苯基，或者R代表呋喃基、吡啶基或喹啉基；R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫，C1-C6烷基，C6-C12芳基或任選地被C2-C6-烷氧羰基取代的C7-C12芳烷基；R4和R5代表氫或C1-C6烷基。22.根據(jù)權(quán)利要求21的用途，其中所述平滑肌細(xì)胞增殖在血管成形術(shù)之后表現(xiàn)為再狹窄。23.一種藥物組合物，包括權(quán)利要求1至17中任一項(xiàng)所述的式I或II化合物和可藥用載體。24.治療哺乳動(dòng)物的方法，包括給這種哺乳動(dòng)物口服或非腸道施用下述式I或II化合物或它們的可藥用鹽其中R代表苯基或被鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烷基、三氟甲基取代的苯基，或者R代表呋喃基、吡啶基或喹啉基；R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫，C1-C6烷基，C6-C12芳基或任選地被C2-C6-烷氧羰基取代的C7-C12芳烷基；R4和R5代表氫或C1-C6烷基。25.根據(jù)權(quán)利要求24的方法，所述方法用于預(yù)防哺乳動(dòng)物的平滑肌細(xì)胞增殖。26.根據(jù)權(quán)利要求25的方法，其中平滑肌細(xì)胞增殖在血管成形術(shù)之后表現(xiàn)為再狹窄。27.下述式I或II化合物或它們的可藥用鹽的制備方法其中R代表苯基或被鹵素、羥基、C1-C6-烷氧基、C1-C6-烷基、三氟甲基取代的苯基，或者R代表呋喃基、吡啶基或喹啉基；R1和R2代表氫，鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，硝基，羧基，C2-C7烷氧羰基或C7-C12-芳氧基羰基；R3代表氫，C1-C6烷基，C6-C12芳基或任選地被C2-C6-烷氧羰基取代的C7-C12芳烷基；R4和R5代表氫或C1-C6烷基，該方法包括(a)使式1腈與醇和氯化氫反應(yīng)，產(chǎn)生式2化合物(b)在醇存在下，使式2化合物與式3化合物反應(yīng)產(chǎn)生式4化合物(c)在烷基化劑存在下，使式4化合物與R3-鹵化物反應(yīng)，產(chǎn)生式I化合物(d)并任選地將式5化合物與(NH4)2Ce(N)3)6在乙酸存在下反應(yīng)，產(chǎn)生式II化合物全文摘要本發(fā)明公開了式(Ⅰ)或(Ⅱ)化合物或它們的可藥用鹽:其中R代表苯基或取代苯基;或者R代表呋喃基,吡啶基或喹啉基;R文檔編號(hào)A61K31/4184GK1192206SQ96195860公開日1998年9月2日申請(qǐng)日期1996年6月3日優(yōu)先權(quán)日1995年6月6日發(fā)明者S-Y·蔡,H·M·艾羅達(dá),T·S·蘇爾科斯基申請(qǐng)人:美國(guó)家用產(chǎn)品公司