專利名稱：煙霉醇衍生物的穩(wěn)定藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及煙霉醇(fumagillol)衍生物(可作為藥物的血管生成抑制物質(zhì))的穩(wěn)定藥物組合物。
血管生成指血管發(fā)育和生長。已發(fā)現(xiàn)血管生成與癌，糖尿病性視網(wǎng)膜病和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病密切相關(guān)。為治療這些疾病，血管生成抑制物質(zhì)是有潛力的，因?yàn)檫@些物質(zhì)可抑制血管發(fā)育并因此抑制向患病部位供血，這是不同于常規(guī)抗癌劑的作用機(jī)理。由于血管生成對(duì)于固態(tài)瘤生長特別關(guān)鍵，所以血管生成抑制物質(zhì)極有助于攻克癌癥。對(duì)血管生成抑制物質(zhì)進(jìn)行篩選，結(jié)果發(fā)現(xiàn)了煙霉醇衍生物并已在EP-A-359，036(JP-A3-7270)，EP-A-357，061(JP-A3-7222)，EP-A-354，787，EP-A-386，667(JP-A3-14571)，EP-A387650(JP-A3-7271)，EP-A-415，294(JP-A3-279376)等文獻(xiàn)中作了說明。
EP-A-470，569(JP-A5-969)公開了血管阻塞劑，其中含有煙霉醇衍生物和血管阻塞物質(zhì)如蠟(如甘油脂肪酸酯)。
本發(fā)明主要目的是提高含有血管生成抑制物質(zhì)的煙霉醇衍生物的穩(wěn)定性，尤其是在水溶液中的穩(wěn)定性，以便通過在用藥部位長時(shí)間緩釋藥物而更有效地發(fā)揮其藥理活性。
本專業(yè)人員可從以下說明中更清楚地看出本發(fā)明該目的及其它目的和優(yōu)越性。
本發(fā)明包括含有煙霉醇衍生物和甘油或聚甘油的脂肪酸酯的藥物組合物。
煙霉醇衍生物例子包括式(Ⅰ)煙霉醇衍生物及其鹽等
其中R1為氫;R2為鹵素，N(O)mR5R6，N+R5R6R7·X-，S(O)nR5或S+R5R6·X-，其中R5，R6和R7分別代表任選取代的烴基或任選取代的雜環(huán)基;X-代表平衡陰離子;m代表0或1;n代表0-2的整數(shù)，或R5和R6與相鄰氮或硫原子一起形成任選取代的含氮或含硫雜環(huán)基并可形成稠合環(huán);或R1和R2一起代表化學(xué)鍵;R3為任選取代的2-甲基-1-丙烯基或異丁基;A為O或NR8，其中R8代表氫，任選取代的低級(jí)烷基或任選取代的芳基;而R4為氫，任選取代的烴基或任選取代的?；?br> 式(Ⅰ)中R2代表的鹵素包括氟，氯，溴和碘。R1和R2一起代表化學(xué)鍵時(shí)，形成環(huán)氧環(huán)。
由R5，R6或R7代表的任選取代的烴基中的烴基包括直鏈或支鏈C1-6烷基(如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基，仲丁基，戊基，異戊基和己基等)，C2-6烯基(如乙烯基，烯丙基，2-丁烯基，甲基烯丙基，3-丁烯基，2-戊烯基，4-戊烯基和5-己烯基等)，C2-6炔基(如乙炔基，炔丙基，2-丁炔-1-基，3-丁烯-2-基，1-戊炔-3-基，3-戊炔-1-基，4-戊炔-2-基和3-己炔-1-基等)，C3-6環(huán)烷基(如環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基和環(huán)己基等)，C3-6環(huán)烯基(如環(huán)丁烯基，環(huán)戊烯基，環(huán)己烯基和環(huán)己二烯基等)，C7-13芳烷基(如芐基，1-苯乙基和2-苯乙基等)以及C6-10芳基(如苯基和萘基等)等等。
由R5，R6或R7代表的任選取代的雜環(huán)基中的雜環(huán)基包括含1-4個(gè)雜原子(如氮，氧和硫等)的5或6元雜環(huán)基，如2-呋喃基，2-噻吩基，4-噻唑基，4-咪唑基，4-吡啶基，1，3，4-噻二唑-2-基和四唑基等。而且，該雜環(huán)基可與除碳原子而外還含1-3個(gè)雜原子(如氮，氧和硫等)的5或6元環(huán)(如苯，吡啶和環(huán)己烷等)稠合而形成稠合雙環(huán)(如8-喹啉基和8-嘌呤基等)。
可由R5和R6與相鄰氮原子形成的含氮雜環(huán)基包括除氮原子而外還可含1-3個(gè)雜原子(如氮，氧和硫等)的4-7元含氮雜環(huán)基(如吡咯烷-1-基，哌啶子基，嗎啉代和哌嗪-1-基等)等等。
可由R5和R6與相鄰硫原子形成的含硫雜環(huán)基包括除硫原子而外還可含1-3個(gè)雜原子(如氮，氧和硫等)的4-7元含硫雜環(huán)基(如四氫噻吩-1-基和1，4-thioxan-1-基等)等等。
可由R5和R6與相鄰氮或硫原子形成的含氮或含硫雜環(huán)基可與5或6元環(huán)(如苯，吡啶，吡嗪，嘧啶，噠嗪和環(huán)己烷等)稠合而形成稠合雙環(huán)基(如異吲哚-2-基，2-異喹啉基，1，3-二氫苯并[c]噻吩-2-基，2，3-二氫苯并[b]噻吩-1-基，3，4-二氫-1H-2-苯并吡喃-2-基，3，4-二氫-2H-1-苯并吡喃-1-基，1，2，4，5-四氫-3-苯并噻吩-3-基，1，3-二氫噻吩并[3，4-c]吡啶-2-基，5，7-二氫噻吩并[3，4-b]吡嗪-6-基和5，7-二氫噻吩并[3，4-d]噠嗪-6-基等)等等。
由R8代表的任選取代的低級(jí)烷基中的低級(jí)烷基包括直鏈或支鏈C1-6烷基(如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基，仲丁基，戊基，異戊基和己基等)等等。
由R8代表的任選取代的芳基中的芳基包括C6-10芳基(如苯基，萘基等)等等。
由R4代表的任選取代的烴基中的烴基包括以上針對(duì)R5，R6或R7代表的任選取代的烴基所說明的烴基。
在R4代表的烴基為烯基時(shí)，其中優(yōu)選無取代基。
由R4代表的任選取代的?；ㄈ芜x取代的酸殘基如來自相應(yīng)酸的酰基，例如羧酰基，磺酰基，氨基甲?；?，硫代氨基甲酰基和氨磺?；?，其中每一?；珊辽僖粋€(gè)取代基。任選取代的?；影ㄍ轷；?，芳?；?，雜環(huán)羰基，氨基甲?；虼被柞；蓟酋；?，烷磺酰基，氨磺酰基，烷氧羰基和芳氧羰基等，其中每一?；珊辽僖粋€(gè)取代基。
上述任選取代的烷酰基中的烷?；–1-6烷?；?如甲酰基，乙?；?，丙?；惐；□；?，戊?；图乎；?等等。
任選取代的芳?；械姆减；–7-11芳?；?如苯甲?；?，1-萘甲?；?-萘甲?；?等等。
任選取代的雜環(huán)羰基中的雜環(huán)羰基包括含1-4個(gè)雜原子(如氮，氧和硫等)的5或6元雜環(huán)羰基，如2-呋喃甲?；?，2-噻吩甲酰基，煙?；彤悷燉；取?br> 任選取代的芳磺?；械姆蓟酋；–6-10芳磺?；?如苯磺酰基，1-萘磺酰基和2-萘磺?；?等等。
任選取代的烷磺?；械耐榛酋；–1-6烷磺?；?如甲磺酰基，乙磺酰基，丙磺?；』酋；臀旎酋；?等等。
任選取代的烷氧羰基中的烷氧羰基包括C2-7烷氧羰基(如甲氧羰基，乙氧羰基和異丁氧羰基等)等等。
任選取代的芳氧羰基中的芳氧羰基包括C7-11芳氧羰基(如苯氧羰基，1-萘氧羰基和2-萘氧羰基等)等等。
由R3代表的任選取代的2-甲基-1-丙烯基或異丁基上的取代基例子包括羥基，氨基，低級(jí)(C1-3)烷基氨基(如甲基氨基，乙基氨基和丙基氨基等)，二低級(jí)(C1-3)烷基氨基(如二甲基氨基和二乙基氨基等)等等。優(yōu)選羥基和二低級(jí)(C1-3)烷基氨基，尤其是二甲基氨基。
由R5，R6或R7代表的任選取代的烴基或任選取代的雜環(huán)基;可由R5和R6與相鄰氮或硫原子形成并可與另一環(huán)稠合的任選取代的含氮或含硫雜環(huán)基;由R8代表的任選取代的低級(jí)烷基或任選取代的芳基;以及由R4代表的任選取代的烴基和任選取代的?；?如烷?；?，芳?；?，雜環(huán)羰基，氨基甲?；虼被柞；?，芳磺酰基，烷磺?；被酋；檠豸驶头佳豸驶?在可能的位置上可含1-3個(gè)取代基。
這些取代基的例子包括C1-6烷基(如甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，異丁基，仲丁基，戊基，異戊基和己基等)，C2-6烯基(如乙烯基，烯丙基，2-丁烯基，甲基烯丙基，3-丁烯基，2-戊烯基，4-戊烯基和5-己烯基等)，C2-6炔基(如乙炔基，炔丙基，2-丁炔-1-基，3-丁炔-2-基，1-戊炔-3-基，3-戊炔-1-基，4-戊炔-2-基和3-己炔-1-基等)，C3-6環(huán)烷基(如環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基和環(huán)己基等)，C3-6環(huán)烯基(如環(huán)丁烯基，環(huán)戊烯基，環(huán)己烯基和環(huán)己二烯基等)，C6-10芳基(如苯基和萘基等)，氨基，-C1-6烷氨基(如甲氨基，乙氨基和異丙氨基等)，二C1-6烷基氨基(如二甲基氨基和二乙基氨基等)，疊氮基，硝基，鹵素(如氟，氯，溴和碘等)，羥基，C1-4烷氧基(如甲氧基和乙氧基等)，C6-10芳氧基(如苯氧基和萘氧基等)，C1-6烷硫基(如甲硫基，乙硫基和丙硫基等)，C6-10芳硫基(如苯硫基和萘硫基等)，氰基，氨基甲?；然?，C1-4烷氧羰基(如甲氧羰基和乙氧羰基等)，C7-11芳氧羰基(如苯氧羰基，1-萘氧羰基和2-萘氧羰基等)，羧基-C1-4烷氧基(如羧甲氧基和2-羧乙氧基等)，C1-6烷?；?如甲?；?，乙?；?，丙?；惐；?，丁酰基，戊酰基和己?；?，C7-11芳?；?如苯甲?；?，1-萘甲?；?-萘甲?；?，C1-6烷磺?；?如甲磺?；鸵一酋；?，C6-10芳磺?；?如苯磺?；?，1-萘磺?；?-萘磺?；?，C1-6烷亞磺?；?如甲基亞磺?；鸵一鶃喕酋；?，C6-10芳亞磺?；?如苯亞磺?；?，1-萘亞磺?；?-萘亞磺?；?，含1-4個(gè)雜原子(如氮，氧和硫等)的5或6元雜環(huán)基(如2-呋喃基，2-噻吩基，4-噻唑基，4-咪唑基，4-吡啶基，1，3，4-噻二唑-2-基和1-甲基-5-四唑基等)，含1-4個(gè)雜原子(如氮，氧和硫等)的5或6元雜環(huán)羰基(如2-呋喃甲?；?，2-噻吩甲酰基，煙?；彤悷燉；?，含1-4個(gè)雜原子(如氮，氧和硫等)的5或6元雜環(huán)硫基(如4-吡啶硫基，2-嘧啶硫基，1，3，4-噻二唑-2-基硫基和1-甲基-5-四唑基硫基等)等等。而且，雜環(huán)硫基可與苯環(huán)稠合而形成稠合雙環(huán)硫基(如2-苯并噻唑硫基和8-喹啉硫基等)。優(yōu)選C1-6烷基和C1-6烷?；?。此外，若R4代表二取代氨基甲?；?，硫代氨基甲?；虬被酋；瑒t取代基可與氨基甲?；?，硫代氨基甲酰基或氨磺?；械牡有纬珊s環(huán)(如除了氮原子而外還可含1-3個(gè)雜原子(如氮，氧和硫等)的4-7元含氮雜環(huán)基，如吡咯烷-1-基，哌啶子基，嗎啉代，哌嗪-1-基，4-甲基哌嗪-1-基和4-苯基哌嗪-1-基等)。
由R5，R6或R7代表的任選取代的烴基或任選取代的雜環(huán)基中的取代基;可由R5和R6與相鄰氮或硫原子形成并可與另一環(huán)稠合的任選取代的含氮或含硫雜環(huán)基中的取代基;由R8代表的任選取代的低級(jí)烷基或任選取代的芳基中的取代基;以及由R4代表的任選取代的烴基和任選取代的酰基(如烷?；?，芳?；?，雜環(huán)羰基，氨基甲?；?，硫代氨基甲酰基，芳磺?；?，烷磺?；?，氨磺酰基，烷氧羰基和芳氧羰基等)中的取代基在可能的位置上可含1-3個(gè)取代基。
這些取代基的例子包括上述C1-6烷基，C2-6烯基，C2-6炔基，C3-6環(huán)烷基，C3-6環(huán)烯基，C6-10芳基，氨基，一C1-6烷氨基，二C1-6烷基氨基，疊氮基，硝基，鹵素，羥基，C1-4烷氧基，C6-10芳氧基，C1-6烷硫基，C6-10芳硫基，氰基，氨基甲?；?，羧基，C1-4烷氧羰基，C7-11芳氧羰基，羧基-C1-4烷氧基，C1-6烷?；?，鹵代C1-6烷?；珻7-11芳?；?，C1-6烷磺?；珻6-10芳磺?；?，C1-6烷亞磺酰基，C6-10芳亞磺酰基，5或6元雜環(huán)基，5或6元雜環(huán)羰基和5或6元雜環(huán)硫基等。
由X代表的平衡陰離子包括例如鹵離子(如碘離子，溴離子和氯離子等)，硫酸根，磷酸根，硝酸根，高氯酸根，四氟硼酸根，甲硫酸根，對(duì)甲苯硫酸根，苯硫酸根，羥基，有機(jī)羧酸根(如草酸根，馬來酸根，富馬酸根，琥珀酸根，檸檬酸根，乳酸根，三氟乙酸根，乳糖醛酸根，乙酸根，丙酸根，酒石酸根和乙基琥珀酸根等)等等。優(yōu)選鹵素離子。
化合物(Ⅰ)分子中有非對(duì)稱中心并且是旋光的。其絕對(duì)構(gòu)型基于原料，即煙霉醇。在表示構(gòu)型時(shí)，其絕對(duì)構(gòu)型與煙霉醇構(gòu)型相同。環(huán)己烷環(huán)上的取代基結(jié)合方式如下…，←和-分別代表α-鍵，β-鍵和α-或β-鍵。
化合物(Ⅰ)中優(yōu)選R1和R2一起代表化學(xué)鍵或R1為氫且R2為N(O)mR5R6，N+R5R6R7·X-，S(O)nR5或S+R5R6·X-，更優(yōu)選S+R5R6·X-。由R5和R6與相鄰硫原子形成并可與5或6元環(huán)稠合形成稠合雙環(huán)基的含硫雜環(huán)基是優(yōu)選的。X-優(yōu)選為鹵素離子。特別優(yōu)選R1和R2一起代表化學(xué)鍵的化合物。
A優(yōu)選為O或NH，更優(yōu)選為O。
R3優(yōu)選為任選由羥基或二烷基氨基取代的2-甲基-1-丙烯基或異丁基。R3更優(yōu)選為2-甲基-1-丙烯基。
R4優(yōu)選為氫，任選取代的氨基甲?；Ｈ〈鶠橛甥u素任選取代的C1-6烷基或C1-6烷?；鶗r(shí)特別優(yōu)選。
化合物(Ⅰ)的優(yōu)選例子包括6-O-(N-氯乙酰基氨基甲?；?煙霉醇，6α-(N′-氯乙酰基脲基)-6-脫氧煙霉醇，4-(N′-氯乙?；寤?-2-(1，2-環(huán)氧-1，5-二甲基-4-己烯基)-1-(1，3-二氫苯并[c]噻吩-2-基鎓正離子)甲基-3-甲氧環(huán)己醇氯化物和6-O-(N-甲基氨基甲酰基)煙霉醇等。
化合物(Ⅰ)分子中含酸性取代基(如羧基等)或堿性取代基(如氨基，一低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基和含氮雜環(huán)基等)時(shí)，可形成其生理允許的鹽。這些鹽的例子包括用無機(jī)堿，有機(jī)堿，無機(jī)酸，有機(jī)酸，堿性或酸性氨基酸等形成的鹽。可形成這些鹽的無機(jī)堿例子包括堿金屬(如鈉和鉀等)以及堿土金屬(如鈣和鎂等)等等;有機(jī)堿例子包括三甲胺，三乙胺，吡啶，甲基吡啶，N，N-二芐基乙二胺，乙醇胺，二乙醇胺，三(羥甲基)氨基甲烷和二環(huán)己基胺等;無機(jī)酸例子包括鹽酸，氫溴酸，硫酸，硝酸和磷酸等;有機(jī)酸例子包括甲酸，乙酸，三氟乙酸，草酸，酒石酸，富馬酸，馬來酸，甲磺酸，苯磺酸和對(duì)甲苯磺酸等;而堿性或酸性氨基酸例子包括精氨酸，賴氨酸，鳥氨酸，天冬氨酸和谷氨酸等。
這些鹽中，與堿形成的鹽(如與無機(jī)堿形成的鹽，與有機(jī)堿形成的鹽和與堿性氨基酸形成的鹽等)代表與化合物(Ⅰ)的取代基中的羧基形成的鹽，而與酸形成的鹽(如與無機(jī)酸形成的鹽，與有機(jī)酸形成的鹽和與酸性氨基酸形成的鹽等)代表可與化合物(Ⅰ)的取代基中的氨基，一低級(jí)烷基氨基，二低級(jí)烷基氨基和含氮雜環(huán)基等形成的鹽。
在化合物(Ⅰ)含二低級(jí)烷基氨基，含氮雜環(huán)基或含氮芳環(huán)基時(shí)，這些基團(tuán)中的氮原子可進(jìn)一步烷基化形成季銨基(如三甲銨基，N-甲基吡啶基和N-甲基吡咯烷-1-基鎓等)，而其平衡陰離子包括針對(duì)X-所說明的平衡陰離子。
式(Ⅰ)化合物或其鹽可用煙霉醇作原料制得[見Tarbell，D.S.etal.，J.Am.Chem.Soc.83，3096)(1961)]，所說煙霉醇是由微生物得到的煙曲霉素的水解產(chǎn)物。生產(chǎn)方法以及其物理和生物性已在上述EP-A359，036，EP-A357，061和EP-A354，787等中作了詳細(xì)說明。
本發(fā)明中甘油或聚甘油的脂肪酸可用作煙霉醇衍生物的穩(wěn)定劑。從其對(duì)煙霉醇衍生物的穩(wěn)定效果或緩放效果角度看，含6-22個(gè)碳原子的飽和脂肪酸優(yōu)選作為甘油或聚甘油脂肪酸酯中的脂肪酸。其例子包括己酸(C6)，辛酸(C8)，癸酸(C10)，月桂酸(C12)，肉豆蔻酸(C14)，棕櫚酸(C16)，硬脂酸(C18)，花生酸(C20)和山萮酸(C22)等?！磅セ取敝父视突蚓鄹视椭舅狨ブ絮セu基與總羥基之比。該酯化度優(yōu)選不低于約60%，更優(yōu)選不低于約80%。聚甘油的聚合度優(yōu)選為2-16。
甘油或聚甘油的脂肪酸酯可單獨(dú)或其兩種或多種組合應(yīng)用。優(yōu)選脂肪酸酯適當(dāng)加以選擇以使酯化度不低于約80%。
甘油脂肪酸酯優(yōu)選為脂肪酸甘油三酯(即三?；视?，其中通過酯鍵將三分子脂肪酸與一分子甘油連接。待酯化脂肪酸可相同或不同并且優(yōu)選為含6-22個(gè)，更優(yōu)選含8-18個(gè)，特別優(yōu)選含8-12個(gè)碳原子的飽和脂肪酸。
某些脂肪酸甘油三酯已市售，這些市售脂肪酸甘油三酯例子包括Miglyol810(辛酸/癸酸甘油三酯;脂肪酸組成辛酸＝65-75%，癸酸＝25-35%)，Miglyol812(辛酸/癸酸甘油酯;脂肪酸組成辛酸＝50-65%，癸酸＝30-45%)，Dynasan110(癸酸甘油三酸)，Dynasan112(月桂酸甘油三酯)，Dynasan114(肉豆蔻酸甘油三酯)，Dynasan116(棕櫚酸甘油三酯)，Dynasan118(硬脂酸甘油三酯)等，來自HulsAktiengesellschaft，Germany;以及TriesterF-810(辛酸/癸酸甘油三酯)等，來自NikkoChemicals，Tokyo，Japan。
這些甘油三酯可兩種或多種混合使用。
如上所述，優(yōu)選聚甘油脂肪酸酯中聚甘油選自各種甘油聚合物，其中甘油聚合度為2-16，更優(yōu)選為2-10。其中羥基(羥基數(shù)聚合度+2)中的至少一個(gè)羥基，優(yōu)選總羥基中不少于80%由脂肪酸酰化。這些脂肪酸優(yōu)選為飽和脂肪酸。飽和脂肪酸優(yōu)選含6-22個(gè)，更優(yōu)選含8-18個(gè)碳原子。待酯化脂肪酸可相同或不同。市售聚甘油脂肪酸酯中甘油聚合度，脂肪酸種類和酯化度各不相同。本發(fā)明可用任何這類市售品。
市售聚甘油脂肪酸酯例子包括PS-310(四甘油五硬脂酸酯)，DAS-750(十甘油十硬脂酸酯)等，來自SakamotoYakuhin(Osaka，Japan);PoemJ-46B(四甘油六山萮酸酯)等，來自RikenVitamin(Tokyo，Japan);Tetraglyn5-S(四甘油五硬脂酸酯)，Decaglyn10-S(十甘油十硬脂酸酯等，來自NikkoChemicals(Tokyo)。
這些聚甘油脂肪酸酯可單獨(dú)或兩種或多種混合使用。這些酯也可與甘油脂肪酸酯混用。
本發(fā)明藥用組合物為包括煙霉醇衍生物和甘油或聚甘油脂肪酸酯的組合物，其中煙霉醇衍生物被穩(wěn)定化。該藥物組合物可呈液態(tài)或固態(tài)，優(yōu)選呈液態(tài)。該藥物組合物可由已知方法得到，如用以下方法得到。
在用室溫下為液體的甘油或聚甘油脂肪酸酯的情況下，按常規(guī)方法如攪拌法將煙霉醇衍生物加入脂肪酸酯中并使其溶于或分散在其中而得到要求組合物。
在用室溫下為固體的甘油或聚甘油脂肪酸酯的情況下，將酯先轉(zhuǎn)化為液態(tài)。然后將煙霉醇衍生物溶于或分散在其中，之后再固化。這可按已知方法進(jìn)行。例如，將甘油或聚甘油脂肪酸酯加熱到不低于其熔點(diǎn)的溫度，然后將煙霉醇衍生物溶于或分散在液態(tài)脂肪酸酯中，所得溶液或分散液冷卻固化。必要時(shí)，可按已知方法固化成為顆粒或丸粒。在形成顆粒的情況下，優(yōu)選形成例如粒徑為約10-約1000μm的球形微粒?？砂匆阎椒ㄐ纬深w粒(見例如EP-A368，247)。所說方法的例子包括將上述煙霉醇衍生物溶液或分散體分散到水相中的方法，噴霧干燥法以及形成微小油滴后迅速冷卻使其固化的噴霧冷卻法。為了避免顆粒結(jié)塊。必要時(shí)用含有例如分散劑(如Tween，羧甲基纖維素和聚乙烯醇等)的水溶液等作為水相。
組合物中以甘油或聚甘油脂肪酸酯計(jì)的煙霉醇比例可根據(jù)這些組分的物化性能如溶解性和分散性以及煙霉醇衍生物的有效劑量而適當(dāng)加以選擇。該比例優(yōu)選為約0.001-約50%(w/v)，更優(yōu)選為約0.01-約30%(w/v)。
組合物中煙霉醇的濃度可根據(jù)組合物的物化性能適當(dāng)加以選擇。該濃度可為約0.0005-約30%(w/v)，優(yōu)選為約0.005-約25%(w/v)。
本發(fā)明組合物中可用常用于制備藥劑的添加劑。這些添加劑例子包括用于制備注射劑的添加劑，如防腐劑(如芐醇，乙醇，氯芐烷銨，苯酚和氯丁醇等)，抗氧化劑(如丁基羥基茴香醚，棓酸丙酯，抗壞血酸棕櫚酸鹽和α-生育酚等)，增稠劑(如卵磷脂，羥丙基纖維素和硬脂酸鋁等)等等。
本發(fā)明藥物組合物優(yōu)選按已知方法以藥用無菌形式得到。
本發(fā)明藥物組合物易于按已知方法在用例如注射用蒸餾水，氯化鈉，糖(如葡萄糖，甘露糖醇和肌醇等)，分散劑(如Tween80(由AtlasPowder制造)，HCO60(由NikkoCnemicals制造)，聚乙二醇，羧甲基纖維素，羧甲基纖維素鈉和藻酸鈉等)等等制成的水懸浮液中分散成為乳液或懸濁液。分散后，煙霉醇衍生物以有效治療待治療疾病的濃度的注射劑靜脈，動(dòng)脈，肌肉或皮下給藥或投入器官或病灶如腫瘤中。當(dāng)藥物組合物呈液態(tài)時(shí)，可作為注射劑直接給藥。
按已知方法，本發(fā)明藥物組合物可制成非注射用藥劑型如制成外用制劑(如經(jīng)鼻制劑和經(jīng)皮制劑等)和栓劑(如直腸栓劑和陰道栓劑等)等等。
為制成外用藥劑，如將本發(fā)明組合物制成固態(tài)，半固態(tài)或液態(tài)經(jīng)鼻制劑。對(duì)于上述固態(tài)制劑，本發(fā)明組合物本身制成粉劑或與加入的載體(如葡萄糖，甘露糖醇，淀粉和微晶纖維素等)，增稠劑(如天然膠，纖維素衍生物和丙烯酸聚合物等)等等混合后制成粉劑。對(duì)于上述液態(tài)制劑，按幾乎同于制備上述注射制劑的方法制成油或水懸浮液。對(duì)于上述半固體制劑，優(yōu)選水或油凝膠或軟膏。在每一種這類制劑情況下，還可加入pH調(diào)節(jié)劑(如羧酸，磷酸，檸檬酸，鹽酸和氫氧化鈉等)，抗菌劑(如對(duì)氧苯甲酸酯，氯丁醇和氯芐烷銨等)等等。
為制成栓劑，可按本身已知的方法將本發(fā)明組合物制成油或水性固體，半固體成液體栓劑。
本發(fā)明藥物組合物毒性低，具有潛在的藥物活性如可用于治療或預(yù)防或抑制與血管生成有關(guān)的疾病，如炎癥(如炎風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等)，糖尿病性視網(wǎng)膜病，腫瘤如惡性瘤(如癌如乳房癌，肝細(xì)胞癌，結(jié)腸癌和Kaposi肉瘤等)。因此，本發(fā)明組合物可用作哺乳動(dòng)物(如大鼠，小鼠，猴，牛，狗和人等)的藥物，如作為治療或預(yù)防與血管生成相關(guān)的疾病，如炎癥(如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等)，糖尿病性視網(wǎng)膜病，腫瘤(如癌如乳房癌，肝細(xì)胞癌，結(jié)腸癌和Kaposi肉瘤等)。例如，在經(jīng)皮下或肌內(nèi)等方式投放組合物治療癌癥時(shí)，煙霉醇的藥理活性可通過本發(fā)明組合物的緩放效果而長時(shí)間獲得。因此，可減少服藥次數(shù)。也可通過向控制癌的動(dòng)脈中直接注射組合物而將該化合物用作化學(xué)阻塞劑。在治療患癌癥的成人情況下，可根據(jù)腫瘤種類，位置，尺寸及煙霉醇衍生物種類適當(dāng)選擇煙霉醇衍生物的效量。例如，可按規(guī)定間隔時(shí)間服用約0.1mg-約5.0g，優(yōu)選約1.0mg-約2.0g，更優(yōu)選約50mg-約1.0g煙霉醇衍生物在甘油或聚甘油脂肪酸酯中的溶液或分散體組合物。
給藥頻率可根據(jù)病癥種類和劑型而適當(dāng)加以選擇。例如，滴鼻劑可每天給藥兩或三次，栓劑通常每天給藥一次。在腸胃外給藥情況下，可每星期皮下或肌內(nèi)注射一至三次積存配方。在向控制腫瘤的動(dòng)脈或腫瘤本身中注射的情況下，不要求經(jīng)常重復(fù)注射，每一至四星期注射一次就足以達(dá)到所需治療效果。
本發(fā)明藥用組合物可提高煙霉醇衍生物的穩(wěn)定性，并且達(dá)到更長遠(yuǎn)的潛在藥理活性。因此，可望達(dá)到更多的治療效果。
而且，藥物組合物可通過穩(wěn)定煙霉醇衍生物而防止其分解。此外，本發(fā)明組合物為緩釋組合物。此外，本發(fā)明組合物可有利地用作藥物制劑等。
以下實(shí)施例詳述本發(fā)明，但本發(fā)明范圍并不僅限于此。
實(shí)施例1將6-O-(N-氯乙?；被柞；?煙霉醇(下稱化合物A)溶于Miglyol812(辛酸/癸酸甘油三酯)(HulsAktiengesellschaft，Germany)中，使化合物A濃度分別達(dá)到1mg/ml(0.1%w/v)和10mg/ml(1%w/v)，以Miglyol812為基礎(chǔ)，得到均勻溶液。將這些溶液分裝在小瓶中，其中氣氛用氮?dú)獯?，并且將其放?7℃下。確定剩余化合物A的比例。作為對(duì)比，將化合物A分別溶于芝麻油，Lipiodol(主要成分為碘化罌粟籽油)和水中，并同樣試驗(yàn)所得溶液。結(jié)果列于表1。
表137℃下貯存后剩余化合物A的比例1天后5天后14天后Miglyol812溶液1mg/ml100.0%98.5%98.8%10mg/ml99.2%98.1%100.0%水溶液1mg/ml2.2%0.0%0.0%芝麻油溶液10mg/ml---96.6%83.8%Lipiodol溶液1mg/ml99.7%95.2%75.7%10mg/ml101.0%96.0%89.0%即使14天后，脂肪酸甘油三酯，即Myglyol812中的化合物A也幾乎不分解，并且比處于水溶液和其它油溶液中更穩(wěn)定。
從含Myglyol812的這種制劑的優(yōu)異穩(wěn)定性可以看出，在缺乏水的情況下用含飽和脂肪酸的甘油三酯組合物可阻止通過水解和氧化而達(dá)到的分解。
實(shí)施例2化合物A溶于Myglyol812中，使其濃度達(dá)10mg/ml(1%w/v)，以Myglyol812為基礎(chǔ)，從而制成均勻溶液。該溶液分裝在小瓶中，其中氣氛用氮?dú)獯?。將小瓶分別置于25℃，40℃和60℃下。1月和2月后測定剩余化合物比例。用Lipiodol進(jìn)行類似試驗(yàn)。結(jié)果列在表2中。
表21個(gè)月后剩余化合物A的比例25℃40℃60℃Miglyol812100.3%98.5%89.6%溶液Lipiodol95.8%73.6%1.1%溶液2個(gè)月后剩余化合物A的比例25℃40℃60℃Miglyol81298.8%96.2%80.0%溶液Lipiodol93.5%56.9%0.2%溶液化合物A在Miglyol812中比在Lipiodol中更穩(wěn)定。
實(shí)施例3
為測試在血液或體液中的剩余化合物A的比例，向?qū)嵤├?中所用每一種溶液(1ml)中加1/30M磷酸鹽緩沖液(pH，每次5ml)?；旌衔飻嚢瑁D(zhuǎn)動(dòng)器轉(zhuǎn)速10rpm。油相中化合物A量隨時(shí)間測定(即37℃下1天，2天和7天測定)，從而計(jì)算剩余化合物A比例。結(jié)果列在表3中。
表3剩余化合物A的比例1天后2天后7天后Miglyol812溶液1mg/ml57.8%44.1%2.8%10mg/ml61.8%50.2%10.7%芝麻油溶液10mg/ml22.4%15.3%0.0%Lipiodol溶液1mg/ml39.3%25.6%2.5%10mg/ml53.1%28.3%5.2%與應(yīng)用其它油溶液的情形比較，應(yīng)用脂肪酸甘油三酯時(shí)化合物A最穩(wěn)定，并且發(fā)現(xiàn)藥物可緩放至少7天。
實(shí)施例4將Dynasan118(硬脂酸甘油三酯，Huls)(5g)加熱到約90℃，使其熔化。然后加入化合物A，使其濃度分別達(dá)到約2%(約2%w/v)和10%(約10%w/v)，以Dynasan118計(jì)，并溶解。這些溶液噴霧冷卻而得到球狀微粒(3g/溶液)，粒徑達(dá)到125-250μm(以下分別稱為TG18-msp(2%)和TG18-msp(10%))。同樣，將Dynasan114(肉豆蔻酸甘油三酯，Huls)(5g)加熱到約60℃，使其熔化。然后加入化合物A，使其濃度分別達(dá)到2%(約2%w/v)和10%(約10%w/v)，以Dynasan114計(jì)，并溶解。將這些溶液噴霧冷卻而得球狀微粒(3g/溶液)，粒徑達(dá)到125-250μm(這些溶液以下分別稱作TG14-msp(2%)和TG14-msp(10%))。
實(shí)施例5按同于實(shí)施例1的方法，將實(shí)施例4所得TG14-msp(2%)，TG14-msp(10%)，TG18-msp(2%)和TG18-msp(10%)放在小瓶中并保持37℃，其中氣氛用氮?dú)獯?，然后測定剩余化合物A的比例。結(jié)果列在表4中。
表437℃下貯存后剩余化合物A的比例5天后14天后TG14-msp(2%)102.3%93.2%TG14-msp(10%)96.7%100.6%TG18-msp(2%)97.5%90.8%TG18-msp(10%)97.5%98.1%與用如表1所示的芝麻油，Lipiodol或水相比，用脂肪酸甘油三酯時(shí)化合物A更穩(wěn)定。特別是在TG14-msp(10%)和TG18-msp(10%)中，化合物A完全或幾乎不會(huì)分解并且即使14天后也極穩(wěn)定。
實(shí)施例6按同于實(shí)施例3的方法，將1/30M磷酸鹽緩沖液(pH7.0，每次5ml)加入實(shí)施例4所得TG18-msp(2%)和TG18-msp(10%)(每次約10mg)中?；旌衔镞M(jìn)行攪拌，其中轉(zhuǎn)動(dòng)器轉(zhuǎn)速10rpm。然后隨時(shí)間對(duì)TG18-msp(2%)和TG18-msp(10%)取樣。測定顆粒中化合物A含量，計(jì)算剩余化合物A的比例。所得結(jié)果列在表5中。
表5剩余化合物的比例1天后3天后7天后14天后TG18-msp(2%)101.0%91.1%85.5%72.0%TG18-msp(10%)83.6%63.5%32.4%13.8%化合物A的釋放速度在TG18-msp(10%)中略高，但在TG18-msp(2%)和TG18-msp(10%)中釋放效果能達(dá)到至少14天。
實(shí)施例7將PoemJ46B(四甘油六山萮酸酯;RikenVitamin，Japan)(3g)加熱到約90℃，使其熔化。然后加入化合物A，使其濃度達(dá)到10重量%(約10%w/v)，以上述PoemJ46B計(jì)，并溶解。之后將該溶液固化而得柱狀顆粒(3g)，其直徑2mm(下稱PoemJ46B粒)。
將所得PoemJ46B粒放在小瓶中并置于37℃下，其中氣氛用氮?dú)獯?，然后測定剩余化合物A的比例。結(jié)果列在表6中。
表637℃下貯存后剩余化合物A的比例1天后5天后14天后PoemJ46B粒102.0%97.6%76.6%與用如表1所示溶液的情況比較，用聚甘油脂肪酸酯時(shí)化合物A極穩(wěn)定。
實(shí)施例8將化合物A溶于Decaglyn10-O(十甘油十油酸酯;NikkoChemicals，Japan)，以Decaglyn10-O計(jì)使其濃度達(dá)到10mg/ml，得到均勻溶液。
按用于實(shí)施例3的方法，將1/30M磷酸鹽緩沖液(pH7.0)(每次5ml)加入實(shí)施例7所得PoemJ46B粒(約10mg)和上述Decaglyn10-O溶液(1ml)中?；旌衔镞M(jìn)行攪拌，其中轉(zhuǎn)動(dòng)器轉(zhuǎn)速10rpm。然后隨時(shí)間測定PoemJ46B粒和Decaglyn10-O溶液中的化合物A含量。計(jì)算剩余化合物A的比例。結(jié)果列在表7中。
表7剩余化合物A的比例1天后2天后7天后14天后PoemJ46B粒96.7%94.8%78.5%58.8%Decaglyn10-O溶液52.4%32.5%3.5%0.0%與用含不飽和脂肪酸的十甘油十油酸酯的情形比較，用甘油脂肪酸酯中脂肪酸為飽和酸的四甘油六山萮酸酯的情況下，化合物A更穩(wěn)定并且緩放效果更優(yōu)。
實(shí)施例9將VX2癌細(xì)胞液皮下移植到雄性KbsJW兔的右后腿的膝下部而得到患癌癥的兔。移植后兩周，將兔分成4組。分別從同一側(cè)的股動(dòng)脈上側(cè)血流投放含化合物A(1mg)的水溶液(1ml)，化合物A(1mg)在Miglyol 812(0.5ml)中的溶液和化合物A(5mg)在Miglyol 812(0.5ml)中的溶液。投藥后5天測定腫瘤體積。計(jì)算相對(duì)比例(V5/V0)(投藥前每組的體積定為100%)和以未處理對(duì)比組體積計(jì)的比例(T/C)。結(jié)果列在表8中。
表8例數(shù)V5/V0T/CMiglyol812溶液1mg用藥組389%37%5mg用藥組675%32%水溶液1mg用藥組-3175%74%未處理(對(duì)比)組21238%100%在投放含化合物A(1mg)的水溶液的一組中，腫瘤體積為未處理組體積的74%，為投藥前體積的175%。另一方面，在動(dòng)脈投放1mg和5mg化合物A的Miglyol812溶液的兩組中，腫瘤體積分別降為未處理組體積的37%和32%，分別為投藥前體積的89%和75%。
實(shí)施例10在移植后2周將類似于實(shí)施例9的患癌癥的兔分成3組。分別從同一側(cè)的股動(dòng)脈上側(cè)血流投放實(shí)施例4得到的TG18-msp(2%)，TG18-msp(10%)，TG14-msp(2%)和TG14-msp(10%)(每種50mg;化合物A每種情況下計(jì)為1mg和5mg)。投藥后5天測定腫癌體積。計(jì)算相對(duì)比例(V5/V0)(投藥前每組的體積定為100%)和以未處理對(duì)比組體積計(jì)的比例(T/C)。結(jié)果列在表9中。
表9例數(shù)V5/V0T/CTG18-msp(2%)投藥組365%27%TG18-msp(10%)投藥組349%21%TG14-msp(2%)投藥組363%26%TG14-msp(10%)投藥組265%27%未處理(對(duì)比)組21238%100%在經(jīng)動(dòng)脈投放TG18-msp(2%)和TG18-msp(10%)的組中，腫瘤體積分別降到27%和21%，分別為投藥前體積的65%和49%。在經(jīng)動(dòng)脈投放TG14-msp(2%)和TG14-msp(10%)的組中，腫瘤體積分別降為未處理組體積的26%和27%，分別為投藥前體積的63%和65%。與表8所示投放水溶液的結(jié)果相比，已觀察到極為顯著的抑制腫瘤生長的潛力或活性。
實(shí)施例11將6-O-(N-氯乙酰基氨基甲?；?煙霉醇(化合物A)(50g)和氯丁醇(30g)溶于Miglyol812(見實(shí)施例1)(11)。該溶液經(jīng)Millipore過濾器(Millex-FG，0.2μm)過濾而除去微生物。將油溶液(每次2ml)裝在安瓿中，其中的氣氛由氮?dú)獯妗Ｔ摪碴橙刍饪诤?21℃下用蒸壓消毒器滅菌20分鐘而得到注射劑(含0.1g化合物A)。
實(shí)施例12將Dynasan118(見實(shí)施例4)(920g)加熱到約90℃而使其熔化。然后將6-O-(N-氯乙?；被柞；?煙霉醇(化合物A)(50g)和氯丁醇(30g)溶于液態(tài)Dynasan118中。所得溶液用噴霧干燥器(MobileMinorsSprayDryer，由Nitroatomizer制造)進(jìn)行噴霧干燥，其中噴嘴溫度為90-100℃。用篩分出粒徑50-200μm的粉末。將甘露糖醇(100g)與500g粉末充分混合。之后將600mg該混合物裝入小瓶中，制成有待用藥前懸浮的注射劑。作為分散介質(zhì)，用1%羧甲基纖維素鈉鹽或0.5%Tween80水溶液，其用量為2ml/小瓶。
實(shí)施例13將4-(N′-氯乙?；寤?-2-(1，2-環(huán)氧-1，5-二甲基-4-己烯基)-1-(1，3-二氫本并[c]噻吩-2-基鎓正離子)甲基-3-甲氧基環(huán)己醇氯化物(下稱化合物B)用聲波儀(SonoCleaner，由KaijoDenki制造)分散在含2%(w/w)Tween80的Miglyol812中，使化合物B濃度以含Tween80的Miglyol812計(jì)為1mg/ml(0.1%w/v)，從而得到均勻懸浮液。
權(quán)利要求
1.藥物組合物，其中包括煙霉醇衍生物和甘油或聚甘油脂肪酸酯。
2.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中將煙霉醇衍生物溶于或分散在甘油或聚甘油脂肪酸酯中。
3.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中甘油脂肪酸酯為脂肪酸甘油三酯。
4.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中煙霉醇衍生物溶于脂肪酸甘油三酯中。
5.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中以甘油或聚甘油脂肪酸酯計(jì)的煙霉醇衍生物比例為約0.001-約50%(w/v)。
6.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中甘油或聚甘油酯化度至少約60%。
7.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中聚甘油聚合度為2-10。
8.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中該組合物包括注射組合物。
9.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中該組合物呈液態(tài)。
10.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中該組合物包括粒徑約10-1000μm的固體微粒組合物。
11.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中煙霉醇衍生物為式(Ⅰ)化合物
其中R1為氫;R2為鹵素，N(O)mR5R6，N+R5R6R7·X-，S(O)nR5或S+R5R6·X-，其中R5，R6和R7分別代表任選取代的烴基或任選取代的雜環(huán)基;X-代表平衡陰離子;m代表0或1;n代表0-2的整數(shù)，或R5和R6與相鄰氮或硫原子一起形成任選取代的含氮或含硫雜環(huán)基并可形成稠合環(huán);或R1和R2一起代表化學(xué)鍵;R3為任選取代的2-甲基-1-丙烯基或異丁基;A為O或NR8，其中R8代表氫，任選取代的低級(jí)烷基或任選取代的芳基;而R4為氫，任選取代的烴基或任選取代的?；?。
12.如權(quán)利要求11的藥物組合物，其中R1和R2一起為化學(xué)鍵，或R1為氫且R2為N(O)mR5R6，N+R5R6R7·X-，S(O)nR5或S+R5R6。X-;A為O或NH;R3為任選取代的2-甲基-1-丙烯基或異丁基，而R4為氫，任選取代的氨基甲?；?。
13.如權(quán)利要求12的藥物組合物，其中R1和R2一起為化學(xué)鍵。
14.如權(quán)利要求12的藥物組合物，其中A為O;R3為可由羥基或二烷基氨基任選取代的2-甲基-1-丙烯基或異丁基;R4為由C1-6烷基或鹵代C1-6烷?；〈陌被柞；?。
15.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中煙霉醇衍生物為6-O-(N-氯乙酰基氨基甲?；?煙霉醇。
16.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中煙霉醇衍生物為4-(N′-氯乙?；寤?-2-(1，2-環(huán)氧-1，5-二甲基-4-己烯基)-1-(1，3-二氫苯并[c]噻吩-2-基鎓正離子)甲基-3-甲氧基環(huán)己醇氯化物。
17.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中構(gòu)成脂肪酸酯的脂肪酸為含6-22個(gè)碳原子的飽和脂肪酸(C6-C22)。
18.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中構(gòu)成脂肪酸酯的脂肪酸的主要成分為辛酸(C8)。
19.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中構(gòu)成脂肪酸酯的脂肪酸的主要成分為癸酸(C10)。
20.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中構(gòu)成脂肪酸酯的脂肪酸的主要成分為辛酸(C8)和癸酸(C10)。
21.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中構(gòu)成脂肪酸酯的脂肪酸的主要成分為月桂酸(C12)。
22.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中構(gòu)成脂肪酸酯的脂肪酸的主要成分為肉豆蔻酸(C14)。
23.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中構(gòu)成脂肪酸酯的脂肪酸的主要成分為棕櫚酸(C16)。
24.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中構(gòu)成脂肪酸酯的脂肪酸的主要成分為硬脂酸(C8)。
25.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中構(gòu)成脂肪酸酯的脂肪酸的主要成分為花生酸(C20)。
26.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中構(gòu)成脂肪酸酯的脂肪酸的主要成分為山萮酸(C22)。
27.如權(quán)利要求1的藥物組合物，其中該組合物為抑制血管生成的組合物。
28.煙霉醇衍生物的滅菌方法，其中包括將煙霉醇衍生物溶于或分散在甘油或聚甘油脂肪酸酯中。
29.抑制血管生成的藥物組合物，其中包括煙霉醇衍生物和甘油或聚甘油脂肪酸酯。
30.抑制血管生成的穩(wěn)定的緩釋組合物，其中包括煙霉醇衍生物和甘油或聚甘油脂肪酸酯。
全文摘要
高穩(wěn)定性藥物組合物中包括煙霉醇衍生物和甘油或聚甘油脂肪酸酯，該組合物可用于治療與血管生成有關(guān)的疾病如肝細(xì)胞瘤等。
文檔編號(hào)A61K31/335GK1093901SQ9312012
公開日1994年10月26日 申請(qǐng)日期1993年12月16日 優(yōu)先權(quán)日1992年12月16日
發(fā)明者柳井薰雄, 齋藤和宏, 岡田弘晃 申請(qǐng)人:武田藥品工業(yè)株式會(huì)社