專利名稱：一種天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種天然蠶絲的處理工藝，特別涉及一種天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯的制備方法，本發(fā)明方法所制備的產(chǎn)品的用途也于同日遞交了專利申請(qǐng)。
背景技術(shù)：
目前，在臨床上使用的人體體內(nèi)手術(shù)用補(bǔ)片、支撐物或植入物等醫(yī)用器材，都是由不同的原料制備的，因?yàn)樗鼈兪褂貌课徊煌?，要求的條件不同，沒有一種原料能夠同時(shí)滿足所有的條件可以用來制備這類醫(yī)用器材。如疝修補(bǔ)所用的人造網(wǎng)狀補(bǔ)片，制備這類器理想的材材料是強(qiáng)度高、柔韌性好。目前臨床上制備這類補(bǔ)片采用聚丙烯和膨化聚四氟乙烯為原材料，這種原材料強(qiáng)度好、修補(bǔ)牢固、不易復(fù)發(fā)、無毒性及異物反應(yīng)，但質(zhì)地柔性不佳、 比較堅(jiān)硬。由于疝修補(bǔ)手術(shù)需要圍繞男患者精索周圍進(jìn)行固定且修補(bǔ)部位臨近皮下，因而常常導(dǎo)致精索受到壓迫，血液循環(huán)不暢，以致于導(dǎo)致缺血性睪丸炎，睪丸萎縮及射精障礙綜合癥等；且患者從皮膚表面即可觸及補(bǔ)片，會(huì)有異物感及不適感；另外由于這種材料不可吸收，這種不適感會(huì)伴隨患者終身。再如，肌腱損傷損傷手術(shù)修補(bǔ)所使用的外固定補(bǔ)片，需要質(zhì)地堅(jiān)韌，這樣才能保證其能夠在術(shù)后耐受高強(qiáng)度拉力以免造成手術(shù)后的再撕裂；而目前臨床使用的補(bǔ)片是以去細(xì)胞的豬皮為原料制備的，這種補(bǔ)片低免疫原性、排斥反應(yīng)小、力學(xué)性能好，能夠在術(shù)后耐受高強(qiáng)度拉力，可以滿足臨床肌腱補(bǔ)片所需要求，但是制作工藝繁瑣，成本高昂，且會(huì)出現(xiàn)外源性異種異體產(chǎn)品的免疫反應(yīng)。人造血管及血管搭橋、支架植入作為大血管替代品或擴(kuò)張梗塞動(dòng)脈的常規(guī)治療方式已廣泛應(yīng)用于臨床，有明確的治療效果，但繼之產(chǎn)生的問題是血栓形成、擴(kuò)張部位的再狹窄，因?yàn)橹圃爝@些醫(yī)用器材的原料，是尼龍、滌綸、聚四氟乙稀或鈦，鈦合金、不銹鋼等，這些材料無法附著人內(nèi)皮細(xì)胞形成內(nèi)皮保護(hù)層，因而會(huì)導(dǎo)致血栓形成及再次狹窄梗塞。經(jīng)查閱，雖然臨床上也曾以未處理的蠶絲作為傷口縫線，但由于其容易引起縫合部位嚴(yán)重的的炎癥反應(yīng)，表現(xiàn)為局部組織的紅腫痛熱，滲出，積液，所以并沒有以其作為制備醫(yī)療器材原料的記載。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明人經(jīng)過大量的實(shí)驗(yàn)研究，終于找到了一種優(yōu)良的、可制備多種人體體內(nèi)手術(shù)醫(yī)用器材的原料及其制備方法。本發(fā)明的目的是提供一種天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯的制備方法。本發(fā)明方法通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)，步驟包括
1)將天然蠶絲生絲編織成體內(nèi)手術(shù)所需任意大小形態(tài)的醫(yī)用器材；
2)用碳酸鈉和十二烷基硫酸鈉按所述比例配制混合液；之后將醫(yī)用器材放入混合液中，在40-80°C的條件下震蕩脫膠30-40分鐘，棄去混合液，混合液各組分的質(zhì)量比為碳酸鈉去離子水=0.01-0. 10 100，十二烷基硫酸鈉去離子水=0.01-0. 3:100 ；
3)加入與混合液等量的重量百分比濃度為1%的檸檬酸，中和殘留；然后用去離子水將醫(yī)用器材震蕩清洗3次，每次10-30分鐘；
4)將步驟3)處理后的醫(yī)用器材浸入0.IM含鏈霉蛋白酶磷酸鹽緩沖溶液中，在40-60°C 的條件下震蕩60-120分鐘，進(jìn)行進(jìn)一步脫膠；所述0. IM含鏈霉蛋白酶磷酸鹽緩沖溶液的質(zhì)量比為鏈霉蛋白酶0. IM磷酸鹽緩沖液=1:200-500 ；
5)酶脫膠完畢后，將溶液加熱至40-85°C，滅酶活性10分鐘；
6)將醫(yī)用器材用去離子水中清洗3次，每次10分鐘；
7)將醫(yī)用器材取出，晾干，用環(huán)氧乙烷滅菌，包裝。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和特點(diǎn)
1.本發(fā)明方法制備的產(chǎn)品具有良好的力學(xué)性能和柔韌性，適合制備多種體內(nèi)醫(yī)用器材；且由于蠶絲需要很長(zhǎng)一段時(shí)間才能徹底降解吸收，所以在本產(chǎn)品降解之前創(chuàng)面已經(jīng)可以牢固愈合。2.本發(fā)明方法制備的產(chǎn)品經(jīng)動(dòng)物測(cè)試，體內(nèi)無炎癥反應(yīng)，免疫排斥反應(yīng)，毒性反應(yīng)；體外(力學(xué)，細(xì)胞學(xué))，獲得了滿意的效果。3.本發(fā)明方法制備的產(chǎn)品可作為制備多數(shù)醫(yī)用器材的原料，如可以制備人體體內(nèi)手術(shù)補(bǔ)片、人造血管或血管支架等。4.通過個(gè)性化對(duì)待每一位患者，可望很好地解決人造血管及血管搭橋、支架植入后存在的血栓形成及擴(kuò)張部位的再狹窄問題。實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明產(chǎn)品非常適合細(xì)胞的粘附， 生長(zhǎng)，增生及分化；使用患者自體上皮細(xì)胞，用組織工程的方法在編織人造血管內(nèi)層添加一層患者本人的內(nèi)皮組織，即可望解決上述再栓塞及血栓形成的問題。5.本方法所需原料在我國(guó)存在廣泛，制備工藝簡(jiǎn)單，產(chǎn)品制造成本低；與人工合成相比較，本法方法采用的試劑均無毒，且無廢物殘留，對(duì)操作人員及環(huán)境無任何毒性傷害。本申請(qǐng)中所采用的名詞具有以下含義
天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯是指將天然蠶絲經(jīng)處理后得到的、絲膠蛋白已被徹底去除、且應(yīng)用于人體時(shí)不會(huì)引起炎癥反應(yīng)但仍然保持天然蠶絲力學(xué)性能的蠶絲。
具體實(shí)施例方式為了理解本發(fā)明，下面以實(shí)施例做進(jìn)一步的說明，但不限制本發(fā)明。實(shí)施例1 制備人體體內(nèi)手術(shù)用補(bǔ)片
將天然蠶絲單根或雙根生絲編織成為尺寸規(guī)格為6X7. 5cm、6X7. 5cm、6X13. 8cm、 15 X 15cm、25 X 35cm、網(wǎng)孔直徑為l_2mm的幾種長(zhǎng)方形補(bǔ)片。取0. 10克碳酸鈉和3克十二烷基硫酸鈉，溶于1000克去離子水中，充分?jǐn)嚢瑁瞥苫旌弦?；將補(bǔ)片放入混合液中，在60°C 的條件下震蕩脫膠30分鐘；棄去混合液，加入1000克的重量百分比濃度為1%的檸檬酸充分洗滌；再用去離子水震蕩清洗3次，每次20分鐘。將清洗后的補(bǔ)片浸入含鏈霉蛋白酶的 0. IM磷酸鹽緩沖溶液(PH=S)中，在40°C的條件下震蕩90分鐘進(jìn)行酶脫膠，完畢后，將溶液加熱至85°C，滅酶活性10分鐘；最后，將蠶絲補(bǔ)片在去離子水中清洗3次，每次10分鐘；取出，晾干，用環(huán)氧乙烷滅菌，包裝。含鏈霉蛋白酶的0. IM磷酸鹽緩沖溶液(PH=S)的制備取0. IM的磷酸鹽緩沖溶液 (PH=8) 500克，加入1克鏈霉蛋白酶，即得。
實(shí)施例2 制備人造血管
將天然蠶絲編織成所需形態(tài)的補(bǔ)片；取去離子水1000克，加入1克碳酸鈉和3克十二烷基硫酸鈉，充分?jǐn)嚢枞芙馀涑苫旌弦?；將補(bǔ)片放入混合液中，在80°C的條件下震蕩脫膠 30分鐘；棄去混合液，加入1000毫升重量百分比濃度為1%的檸檬酸充分洗滌；再用去離子水震蕩清洗3次，每次20分鐘。之后將補(bǔ)片浸入含鏈霉蛋白酶的0. IM磷酸鹽緩沖溶液 (PH=S)中，按實(shí)施例1繼續(xù)操作，即得以天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯制備的人體體內(nèi)手術(shù)用補(bǔ)片。含鏈霉蛋白酶的0. IM磷酸鹽緩沖溶液(PH=S)的制備取0. IM的磷酸鹽緩沖溶液 (PH=8) 200克，加入1克鏈霉蛋白酶，即得。實(shí)施例3 制備人體體內(nèi)手術(shù)用補(bǔ)片
取去離子水1000克，加入0. 5克碳酸鈉和2. 9克十二烷基硫酸鈉，充分?jǐn)嚢枞芙獾没旌弦?。?. IM的磷酸鹽緩沖溶液(PH=S) 300克，加入1克鏈霉蛋白酶，得含鏈霉蛋白酶的0. IM磷酸鹽緩沖溶液(PH=8)。將天然蠶絲編織成所需血管形態(tài)，按實(shí)施例1進(jìn)行操作，即得以天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯制備的人造血管。實(shí)施例4 制備血管支架
取去離子水1000克，溶入1克碳酸鈉和1. 5克十二烷基硫酸鈉，充分?jǐn)嚢枞芙獾没旌弦?。?. IM的磷酸鹽緩沖溶液(PH=S) 300克，加入1克鏈霉蛋白酶，得含鏈霉蛋白酶的0. IM磷酸鹽緩沖溶液(PH=8)。將天然蠶絲編織的血管支架，按實(shí)施例1的操作進(jìn)行處理，即得以天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯制備的血管支架。
權(quán)利要求
1. 一種天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯的制備方法，其特征在于步驟包括1)將天然蠶絲生絲編織成體內(nèi)手術(shù)所需任意大小形態(tài)的醫(yī)用器材；2)用碳酸鈉和十二烷基硫酸鈉按所述比例配制混合液；之后將醫(yī)用器材放入混合液中，在40-80°C的條件下震蕩脫膠30-40分鐘，棄去混合液，混合液各組分的質(zhì)量比為碳酸鈉去離子水=0.01-0. 10 100，十二烷基硫酸鈉去離子水=0.01-0. 3:100 ；3)加入與混合液等量的重量百分比濃度為1%的檸檬酸，中和殘留；然后用去離子水將醫(yī)用器材震蕩清洗3次，每次10-30分鐘；4)將步驟3)處理后的醫(yī)用器材浸入0.IM含鏈霉蛋白酶磷酸鹽緩沖溶液中，在40-60°C 的條件下震蕩60-120分鐘，進(jìn)行進(jìn)一步脫膠；所述0. IM含鏈霉蛋白酶磷酸鹽緩沖溶液的質(zhì)量比為鏈霉蛋白酶0. IM磷酸鹽緩沖液溶液=1:200-500 ；5)酶脫膠完畢后，將溶液加熱至40-85°C，滅酶活性10分鐘；6)將醫(yī)用器材用去離子水中清洗3次，每次10分鐘；7)將醫(yī)用器材取出，晾干，用環(huán)氧乙烷滅菌，包裝。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種天然蠶絲無絲膠絲纖蛋白芯的制備方法，本發(fā)明方法制備方法所需原料存在廣泛，工藝簡(jiǎn)單；所得產(chǎn)品制造成本低；同時(shí)經(jīng)測(cè)試所得產(chǎn)品具有良好的力學(xué)性能和柔韌性，無炎癥反應(yīng)，免疫排斥反應(yīng)，毒性反應(yīng)，可作為制備多數(shù)醫(yī)用器材的材料，如可用于制備人體體內(nèi)手術(shù)補(bǔ)片、人造血管或血管支架等。
文檔編號(hào)A61L27/22GK102304812SQ201110263438
公開日2012年1月4日 申請(qǐng)日期2011年9月7日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月7日
發(fā)明者邱軼偉 申請(qǐng)人:邱軼偉