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一種鹿銜草多糖在制備增強免疫力藥物和保健食品中的應(yīng)用的制作方法

發(fā)布時間:2025-04-06

專利名稱:一種鹿銜草多糖在制備增強免疫力藥物和保健食品中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域,特別是一種鹿銜草多糖在制備增強免疫力藥物和保健食品中的應(yīng)用。
背景技術(shù)
近年來,隨著天然藥物化學(xué)、藥理學(xué)的飛速發(fā)展,已有大量實驗證明,從天然產(chǎn)物中分離出來的多糖對抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、抗衰老、降血糖、降血脂、愈潰瘍、提高人體免疫力等方面都有非常顯著的效果。并且,許多天然產(chǎn)物中的多糖具有較強的生物活性,為其有效成分。鹿銜草始載于《滇南本草》,具有祛風(fēng)濕,強筋骨,止血等功效,臨床用于治療風(fēng)濕痹痛,腰膝無力,月經(jīng)過多,久咳勞嗽等癥?,F(xiàn)代研究表明,鹿銜草中含有黃酮、鞣質(zhì)、多酚類等化學(xué)成分,并對其藥理作用有了較深入的研究,但對其多糖類成分的提取分離及其藥理活性的研究卻未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
針對上述情況,為解決現(xiàn)有技術(shù)之缺陷,本發(fā)明的目的就是提供一種鹿銜草多糖在制備增強免疫力藥物和保健食品中的應(yīng)用,可有效解決制備增強人體免疫功能的藥物及保健品的問題。本發(fā)明解決的技術(shù)方案是,鹿銜草多糖在制備增強免疫力藥物和保健食品中的應(yīng)用,該鹿銜草多糖是取鹿銜草藥材粉末,按料液重量比1:5-30加水,攪拌均勻,60 100°C水浴提取2 3次,每次I 3h,過濾,合并濾液,濃縮至體積為鹿銜草重量的2 4倍,得多糖濃縮液,在多糖濃縮液中攪拌下緩慢加入體積濃度為95%以上的乙醇溶液并充分?jǐn)嚢?,直至含醇量達到體積濃度為80% 90%,密封,4°C靜置過夜8-12小時,離心得多糖沉淀,再依次用無水乙醇、丙酮、無水乙醚洗滌,真空干燥,得鹿銜草多糖;所述的鹿銜草藥材粉末是鹿銜草經(jīng)粉碎過24目篩的粉末;所述的與鹿銜草藥材粉末混合的水為自來水、或純凈水、或蒸餾水、或去離子水。本發(fā)明提取工藝簡單、方便,提取的鹿銜草多糖可用于增強機體免疫功能的藥物及保健食品的開發(fā),開辟了鹿銜草藥材的新的應(yīng)用前景,具有巨大的經(jīng)濟及社會效益。
具體實施例方式以下結(jié)合實施例對本發(fā)明的具體實施方式
作詳細(xì)說明。鹿銜草多糖在制備增強免疫力藥物和保健食品中的應(yīng)用,該鹿銜草多糖是由以下實施例和技術(shù)資料給出
實施例I
取鹿銜草藥材粉末,按料液重量比I :10加水,攪拌均勻,90°C水浴提取3次,每次lh,過濾,合并濾液,濃縮至體積為鹿銜草重量的2倍,得多糖濃縮液,在多糖濃縮液中攪拌下緩慢加入體積濃度為95%以上的乙醇溶液并充分?jǐn)嚢?,直至含醇量達到體積濃度為80%,密封,4°C冷藏靜置過夜12小時,離心得多糖沉淀,再依次用無水乙醇洗滌2次、丙酮洗滌I次、無水乙醚洗滌I次,真空干燥,得鹿銜草多糖。計算多糖獲得率,經(jīng)苯酚-硫酸法(常規(guī)測定方法,是公知技術(shù))測定含糖含量,結(jié)果表明所提取的鹿銜草多糖得率為8. 92%,含糖量為 17. 88%o實施例2 取鹿銜草藥材粉末,按料液重量比I :5加水,攪拌均勻,60°C水浴提取2次,每次3h,過濾,合并濾液,濃縮至體積為鹿銜草重量的2倍,得多糖濃縮液,在多糖濃縮液中攪拌下緩慢加入體積濃度為95%以上的乙醇溶液并充分?jǐn)嚢?,直至含醇量達到體積濃度為90%,密封,4°C冷藏靜置過夜8小時,離心得多糖沉淀,再依次用無水乙醇洗滌2次、丙酮洗滌I次、無水乙醚洗滌2次,真空干燥,得鹿銜草多糖,多糖得率為4. 02%,含糖量為16. 91%。實施例3
取鹿銜草藥材粉末,按料液重量比I :30加水,攪拌均勻,100°C水浴提取3次,每次2h,過濾,合并濾液,濃縮至體積為鹿銜草重量的4倍,得多糖濃縮液,在多糖濃縮液中攪拌下緩慢加入體積濃度為95%以上的乙醇溶液并充分?jǐn)嚢?,直至含醇量達到體積濃度為80%,密封,4°C冷藏靜置過夜12小時,離心得多糖沉淀,再依次用無水乙醇洗滌2次、丙酮洗滌2次、無水乙醚洗滌I次,真空干燥,得鹿銜草多糖,多糖得率為14. 88%,含糖量為24. 54%。實施例4
取鹿銜草藥材粉末,按料液重量比I :20加水,攪拌均勻,75°C水浴提取3次,每次
2.5h,過濾,合并濾液,濃縮至體積為鹿銜草重量的3倍,得多糖濃縮液,在多糖濃縮液中攪拌下緩慢加入體積濃度為95%以上的乙醇溶液并充分?jǐn)嚢?,直至含醇量達到體積濃度為85%,密封,4°C冷藏靜置過夜10小時,離心得多糖沉淀,再依次用無水乙醇洗滌2次、丙酮洗滌I次、無水乙醚洗滌I次,真空干燥,得鹿銜草多糖,多糖得率為6. 35%,含糖量為20. 76%。本發(fā)明所述從鹿銜草中提取鹿銜草多糖的方法經(jīng)反復(fù)多次實驗(12次),均取得了相同或者相近似的結(jié)果,表明該方法結(jié)論可靠,利于工業(yè)化生產(chǎn),其所制備的鹿銜草多糖具有很好的增強人體免疫力的功能,并為動物試驗充分證明,具體試驗資料情況如下
一.試驗材料
1.試驗動物18 22g昆明種清潔劑小鼠,雌雄各半。由河北省實驗動物中心提供。2.實驗試藥鹿銜草多糖制劑,瑞士染液,香菇多糖制劑(湖北廣仁藥業(yè)有限公司),環(huán)磷酰胺(江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司),枸櫞酸鈉,氯化鈣,氯化鈉,酒石酸鉀鈉,氯化鉀,葡萄糖,磷酸氫二鉀,磷酸二氫鉀,酚紅。二、試驗方法
2.I鹿銜草多糖制劑對正常小鼠巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的影響
取體重18 22 g小鼠50只,雌雄各半,隨機均勻分為5組,每組10只。分別灌服小、中、大劑量的鹿銜草多糖制劑水溶液(10mg/ml,20mg/ml,40mg/ml ;0. 2ml/10g),陽性對照組灌服香菇多糖混懸液(5mg/ml ;0. 2ml/10g),空白對照組灌服等體積的生理鹽水(0.2ml/10g)。每天給藥I次,連續(xù)給藥7天,于第7天給藥后2 h,各組小鼠均腹腔注射5%雞紅細(xì)胞生理鹽水混懸液0.5 mL,給雞紅細(xì)胞4 h后,脫頸椎處死小鼠。腹腔注射漢氏液2.5mL,輕柔小鼠腹部,酒精消毒后在腹部上剪一小孔,用長頸吸管吸取腹腔液約2 mL置于試管中,混勻,然后吸取少許腹腔液于載玻片上,液滴大小約為1.5X2 cm2,將載玻片放在鋪有濕紗布的搪瓷盤中,置于37 °C培養(yǎng)箱中孵育30 min,后用生理鹽水沖去附著的細(xì)胞,瑞士染液染色,自來水沖洗晾干,顯微鏡下觀察小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬情況,并計算吞噬百分率和吞噬指數(shù)。吞噬百分率(%)=(吞噬雞紅細(xì)胞的巨噬細(xì)胞數(shù)/巨噬細(xì)胞總數(shù))X 100%
吞噬指數(shù)=巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的總數(shù)/巨噬細(xì)胞總數(shù)
表I鹿銜草多糖制劑對正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響(x±s)
WWI動物數(shù)(只)I劑量(g/kg) I吞噬百分率(%) I吞噬指數(shù) 空白對照組_10_-_44. 9+6. I_0. 55+0. 06
¥為多糖組元~0. I76.7+3.9**1.29+0.14**
區(qū)銜草多糖小劑量組元~0. I71.0+4.9**1.02+0.05**
遙~銜草多糖中劑量組元~0.265.9+9.9**0.86+0.12**
區(qū)銜草多糖大劑量組 IlO|o. 4|53. 4+3. 5*|o. 71+0. 07**
**表示與空白組比P〈0. 01, *表示與空白組比P〈0. 05
從上表可以看出,與空白對照組比,香菇多糖組與本發(fā)明鹿銜草多糖0. I g/kg、0.2 g/kg劑量組均可顯著提高正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞對雞紅細(xì)胞的吞噬百分率,具有極顯著性意義(P〈0. 01);鹿銜草多糖0. 4 g/kg劑量組可明顯提高正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞對雞紅細(xì)胞的吞噬百分率,具有顯著性意義(P〈0. 05);香菇多糖組與鹿銜草多糖各劑量組均可顯著提高正常小鼠腹腔巨噬細(xì)胞對雞紅細(xì)胞的吞噬指數(shù),具有極顯著性意義(P〈0. 01)。2. 2鹿銜草多糖制劑對正常小鼠血清中溶血素及溶血空斑形成的影響
小鼠規(guī)格、分組、給藥劑量均同2. 1,于給藥第I天各組小鼠均腹腔注射5%雞紅細(xì)胞生理鹽水混懸液0.2 mL/只,進行免疫。于第7天給藥后2 h,小鼠眼眶取血,3500 rpm/min離心10 min,分離血清。用生理鹽水1:100稀釋,取I mL稀釋液與5%雞紅細(xì)胞混懸液0.5mL、10%補體液0. 5 mL,混勻;另設(shè)不加血清的空白管作對照。置37 °C水浴中保溫30 min,然后將試管移入冰水中終止反應(yīng)。吸取各管上清液于紫外分光光度計540 nm處比色,測定溶血素形成細(xì)胞情況。將眼眶取血后的小鼠,脫頸椎處死,解剖取出脾臟,將兩個小鼠脾臟放在一起,用勻漿器勻漿,并調(diào)整脾細(xì)胞混懸液中脾細(xì)胞數(shù)為5 X IO6個/mL。取脾細(xì)胞混懸液I. OmL與
0.2%雞紅細(xì)胞混懸液0. 51^、1:10的豚鼠血清0. 5mL混勻,另設(shè)不加脾細(xì)胞混懸液的空白管作對照,置37 °C水浴中保溫lh,離心,取上清液于紫外分光光度計413nm處比色,測定溶血空斑形成細(xì)胞情況,結(jié)果如下
表2鹿銜草多糖制劑對正常小鼠溶血素及溶血空斑形成的影響(X土s)
組別I動物數(shù)(只)I劑量(g/kg)I溶血素形成(OD)I溶血空斑形成(PD)
空白對照組10一0. 169+0.0050.241+0.013
香菇多糖組10H0.215+0.003**0.266+0.013*
鹿銜草多糖小劑量組10H0.211+0.003**0.271+0.020**
鹿銜草多糖中劑量組100 20.212+0.005**0.276+0.008**
鹿銜草多糖大劑量組IlO|o. 4|o. 168+0. 006|o. 261+0. 023
**表示與空白組比P〈0. 01, *表示與空白組比P〈0. 05
從該表可看出,與空白對照組比,香菇多糖組、鹿銜草0. I g/kg、0.2 g/kg劑量組均可顯著促進正常小鼠溶血素和溶血空斑的形成,而鹿銜草多糖高劑量0. 4 g/kg組對于小鼠溶血素及溶血空斑的形成與空白組差異無統(tǒng)計學(xué)意義,提示,鹿銜草多糖高劑量組對小鼠溶血素及溶血空斑的形成無明顯作用。2. 3鹿銜草多糖對環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)免疫低下小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響 取體重18 22 g小鼠60只,雌雄各半,隨機均勻分為6組分別灌服鹿銜草小、中、
高劑量組多糖水溶液(5mg/ml, 10mg/ml, 20mg/ml ;0. 2ml/10g),香燕多糖混懸液(5mg/ml,
0.2ml/10g)及空白組灌服同體積的生理鹽水(0.2ml/10g)。除空白對照組外,其余各組均建立環(huán)磷酰胺致免疫低下小鼠模型,每只小鼠均腹腔注射濃度為8 mg/mL的環(huán)磷酰胺溶液,連續(xù)3 d,7 10 d后小鼠免疫功能全部降低。于造模第I天,鹿銜草多糖高、中、低3個劑量組分別灌服各自對應(yīng)劑量的鹿銜草多糖溶液0. 2mL/10g ;香菇多糖組灌服0. I g/kg香菇多糖混懸液0. 2 mL/10g ;模型組、空白對照組灌服等體積的生理鹽水。于第7天早上各組小鼠均腹腔注射5%雞紅細(xì)胞生理鹽水混懸液0. 5 mL/只,于給雞紅細(xì)胞2h后給藥,脫頸椎處死小鼠。按2. 2項下方法區(qū)腹腔液、孵育、染色、鏡檢并計算吞噬百分率和吞噬指數(shù),結(jié)果如下
表3鹿銜草多糖制劑對免疫低下小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬功能的影響(X土s)
權(quán)利要求
1.一種鹿銜草多糖在制備增強免疫力藥物和保健食品中的應(yīng)用,該鹿銜草多糖是取鹿銜草藥材粉末,按料液重量比1:5—30加水,攪拌均勻,60 100°C水浴提取2 3次,每次I 3h,過濾,合并濾液,濃縮至體積為鹿銜草重量的2 4倍,得多糖濃縮液,在多糖濃縮液中攪拌下緩慢加入體積濃度為95%以上的乙醇溶液并充分?jǐn)嚢?直至含醇量達到體積濃度為80% 90%,密封,4°C靜置過夜8-12小時,離心得多糖沉淀,再依次用無水乙醇、丙酮、無水乙醚洗滌,真空干燥,得鹿銜草多糖;所述的鹿銜草藥材粉末是鹿銜草經(jīng)粉碎過24目篩的粉末;所述的與鹿銜草藥材粉末混合的水為自來水、或純凈水、或蒸餾水、或去離子水。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的鹿銜草多糖在制備增強免疫力藥物和保健食品中的應(yīng)用,其特征在于,所述的鹿銜草多糖是取鹿銜草藥材粉末,按料液重量比I :10加水,攪拌均勻,90°C水浴提取3次,每次lh,過濾,合并濾液,濃縮至體積為鹿銜草重量的2倍,得多糖濃縮液,在多糖濃縮液中攪拌下緩慢加入體積濃度為95%以上的乙醇溶液并充分?jǐn)嚢?,直至含醇量達到體積濃度為80%,密封,4°C冷藏靜置過夜12小時,離心得多糖沉淀,再依次用無水乙醇洗滌2次、丙酮洗滌I次、無水乙醚洗滌I次,真空干燥,得鹿銜草多糖。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的鹿銜草多糖在制備增強免疫力藥物和保健食品中的應(yīng)用,其特征在于,所述的鹿銜草多糖是取鹿銜草藥材粉末,按料液重量比I :5加水,攪拌均勻,60°C水浴提取2次,每次3h,過濾,合并濾液,濃縮至體積為鹿銜草重量的2倍,得多糖濃縮液,在多糖濃縮液中攪拌下緩慢加入體積濃度為95%以上的乙醇溶液并充分?jǐn)嚢瑁敝梁剂窟_到體積濃度為90%,密封,4°C冷藏靜置過夜8小時,離心得多糖沉淀,再依次用無水乙醇洗滌2次、丙酮洗滌I次、無水乙醚洗滌2次,真空干燥,得鹿銜草多糖。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的鹿銜草多糖在制備增強免疫力藥物和保健食品中的應(yīng)用,其特征在于,所述的鹿銜草多糖是取鹿銜草藥材粉末,按料液重量比I :30加水,攪拌均勻,100°C水浴提取3次,每次2h,過濾,合并濾液,濃縮至體積為鹿銜草重量的4倍,得多糖濃縮液,在多糖濃縮液中攪拌下緩慢加入體積濃度為95%以上的乙醇溶液并充分?jǐn)嚢?,直至含醇量達到體積濃度為80%,密封,4°C冷藏靜置過夜12小時,離心得多糖沉淀,再依次用無水乙醇洗滌2次、丙酮洗滌2次、無水乙醚洗滌I次,真空干燥,得鹿銜草多糖。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的鹿銜草多糖在制備增強免疫力藥物和保健食品中的應(yīng)用,其特征在于,所述的鹿銜草多糖是取鹿銜草藥材粉末,按料液重量比I :20加水,攪拌均勻,75°C水浴提取3次,每次2. 5h,過濾,合并濾液,濃縮至體積為鹿銜草重量的3倍,得多糖濃縮液,在多糖濃縮液中攪拌下緩慢加入體積濃度為95%以上的乙醇溶液并充分?jǐn)嚢?,直至含醇量達到體積濃度為85%,密封,4°C冷藏靜置過夜10小時,離心得多糖沉淀,再依次用無水乙醇洗滌2次、丙酮洗滌I次、無水乙醚洗滌I次,真空干燥,得鹿銜草多糖。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種鹿銜草多糖在制備增強免疫力藥物和保健食品中的應(yīng)用,可有效解決制備增強人體免疫功能的藥物及保健品的問題,其解決的技術(shù)方案是,鹿銜草多糖在制備增強免疫力藥物和保健食品中的應(yīng)用,該鹿銜草多糖是取鹿銜草藥材粉末,加水,攪拌均勻,水浴提取,過濾,合并濾液,濃縮得多糖濃縮液,多糖濃縮液攪拌下加入乙醇至含醇為80%~90%,密封,靜置過夜,離心得多糖沉淀,再依次用無水乙醇、丙酮、無水乙醚洗滌,真空干燥,得鹿銜草多糖,本發(fā)明提取工藝簡單、方便,提取的鹿銜草多糖可用于增強機體免疫功能的藥物及保健食品的開發(fā),開辟了鹿銜草藥材的新的應(yīng)用前景,具有巨大的經(jīng)濟及社會效益。
文檔編號A61K31/715GK102626418SQ20121007982
公開日2012年8月8日 申請日期2012年3月23日 優(yōu)先權(quán)日2012年3月23日
發(fā)明者于雷, 衛(wèi)冰, 張華鋒, 李曉坤, 楊云, 郝鵬飛, 雷雪 申請人:河南中醫(yī)學(xué)院

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  • 專利名稱:一種復(fù)脈定藥物提取物組合、制備方法及其應(yīng)用的制作方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明涉及一種中藥復(fù)方制劑,更具體的說涉及一種復(fù)脈定藥物提取物組合、制備方法及其應(yīng)用。背景技術(shù):復(fù)脈定藥物組合是一劑主要用于治療心律失常的中藥驗方,重慶市中藥研究院在復(fù)
  • 專利名稱:川芎嗪微乳以及川芎嗪透皮貼劑及其制備方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明涉及一種川芎嗪微乳以及川芎嗪透皮貼劑及其制備方法。 背景技術(shù):缺血性腦血管疾病是以腦循環(huán)血流量減少為特征的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。目前我國腦血管病患者多于心臟病及癌癥,缺血性腦血管
  • 一種自發(fā)熱能袋的制作方法【專利摘要】本實用新型公開了一種自發(fā)熱能袋,包括袋體,袋內(nèi)裝有自發(fā)熱劑,袋體結(jié)構(gòu)上設(shè)有注水孔,袋體由內(nèi)至外依次為保濕層、保溫層和防護層,保濕層、保溫層和防護層縫合連接或粘結(jié)固定,保濕層為塑質(zhì)薄膜,可防止水分過快的從袋
  • 專利名稱:高能氧抗癌導(dǎo)向合成劑的制作方法高能氧抗癌導(dǎo)向合成劑,是以二氯三嗪三酮為先導(dǎo)化合物經(jīng)優(yōu)化和改造成雙(1,3-二氯-1,3,5-三嗪-2,4,6-三酮)草酸酯,與過氧化氫以腫瘤配型抗原單克隆抗體或多克隆抗體連接脂質(zhì)體為載體分別導(dǎo)向靶部
  • 專利名稱:一種治療心腦血管疾病的中藥制劑及其應(yīng)用的制作方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明涉及一種含有丹參、黃芪、銀杏葉和水蛭活性成分的治療心腦血管疾病的 中藥制劑及其應(yīng)用。本發(fā)明涉及的中藥劑型包括片劑、膠囊及軟膠囊劑、顆粒劑、糖漿劑、微 丸劑、微球劑、膏
  • 專利名稱:小型直線式往復(fù)鋸的制作方法技術(shù)領(lǐng)域:本實用新型涉及一種醫(yī)學(xué)用的頜面骨電動手術(shù)器械,尤其涉及小型直線式往復(fù)鋸。本實用新型是通過如下技術(shù)方案來實現(xiàn)的它包括前外套、后外套、前軸、后軸和安裝在前軸前端的刀具夾持裝置,前外套和后外套首尾安裝
  • 一種新型休閑醫(yī)療輪椅的制作方法【專利摘要】本實用新型公開了一種新型休閑醫(yī)療輪椅,包括有椅背、坐墊、滾輪、扶手和腳踏,所述的坐墊與椅背連接,在坐墊的兩側(cè)設(shè)置有連接軸連接的滾輪,在兩側(cè)滾輪內(nèi)通過軸承與坐墊底部連接,所述的椅背上連接有兩個扶手,所
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